APC-monoklonaler Anti-LGR5-Antikörper für die Durchflusszytometrie – O75473

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LGR5

• LGR5 (auch bekannt als GPR49, GPR67 oder HG38) ist ein G-Protein-gekoppelter Rezeptor mit Leucin-reichen Wiederholungen, der als Rezeptor für R-Spondine (RSPO1–RSPO4) fungiert.
• Nach der Bindung an R-Spondine verstärkt LGR5 den kanonischen Wnt-Signalweg, indem es sich mit phosphoryliertem LRP6 und Frizzled-Rezeptoren verbindet und dadurch die Expression von Wnt-Zielgenen erhöht.
• Im Gegensatz zu klassischen G-Protein-gekoppelten Rezeptoren aktiviert LGR5 keine heterotrimeren G-Proteine zur Signalübertragung.
• LGR5 ist ein etablierter Stammzellmarker des Darmepithels und der Haarfollikel und spielt während der postembryonalen Entwicklung eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung und Aufrechterhaltung adulter intestinaler Stammzellen.
• Der Rezeptor ist hauptsächlich an der Zellmembran lokalisiert und wird außerdem im Golgi-Apparat sowie in der Membran des Trans-Golgi-Netzwerks nachgewiesen.
• Die Expression findet sich in der Skelettmuskulatur, der Plazenta, dem Rückenmark und verschiedenen Hirnregionen. Im Darm markiert LGR5 Stammzellen an der Basis der Krypten im kolorektalen und im Dünndarm-Mukosepithel; außerdem wurde eine Überexpression bei Ovarial-, Kolon- und Leberkrebs beschrieben.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die N-glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken. Aufgrund alternativen Spleißens liegt das Protein in mehreren Isoformen vor.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 480–580 des humanen LGR5 und liegt in einer intrazellulären Region. Das APC-Konjugat ermöglicht die direkte Detektion mittels Durchflusszytometrie ohne Sekundärantikörper.
• Für die Durchflusszytometrie sollte sowohl die Oberflächenfärbung lebender Zellen als auch die intrazelluläre Färbung getestet werden, da die Zugänglichkeit des Epitops variieren kann. Eine Permeabilisierung kann erforderlich sein, wenn das vom Antikörper erkannte Epitop auf der extrazellulären Oberfläche nicht exponiert ist.
• LGR5 wird auf Stammzellpopulationen exprimiert. Für eine genaue Identifizierung von LGR5+-Zellen werden eine geeignete Gewebedissoziation zu Einzelzellsuspensionen und das Gating auf vitale Zellen empfohlen.
• Validieren Sie den Antikörper im relevanten experimentellen System (z. B. in humanen Darmorganoiden, Krebszelllinien oder Primärgewebe) unter Verwendung geeigneter Kontrollen.

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