APC Anti-Human CD163 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q86VB7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD163-Funktion und -Lokalisierung

• CD163, auch bekannt als Scavenger-Rezeptor-Cystein-reicher Typ-1-Protein M130 oder Hämoglobin-Scavenger-Rezeptor, ist ein Mitglied der Scavenger-Rezeptor-Cystein-reichen (SRCR) Superfamilie. Er wird durch das CD163-Gen (Gen-ID: 9332) kodiert und existiert in mehreren durch alternatives Spleißen erzeugten Isoformen. Isoform 1 ist im Blut am wenigsten häufig, während Isoform 3 die vorherrschende Isoform ist, die im Blut nachgewiesen wird.
• Der Rezeptor spielt eine kritische Rolle bei der makrophagenvermittelten Clearance von Hämoglobin/Haptoglobin-Komplexen und schützt Gewebe vor oxidativen Schäden durch freies Hämoglobin. Er bindet diese Komplexe auf calcium- und pH-abhängige Weise, wobei er eine höhere Affinität für Komplexe mit multimerem Haptoglobin (HP*1F-Phänotyp) im Vergleich zu dimerem Haptoglobin (HP*1S-Phänotyp) aufweist.
• Nach der Ligandenbindung löst CD163 intrazelluläre Signale aus, die eine tyrosinkinaseabhängige Calcium-Mobilisierung und die Produktion von Inositoltriphosphat beinhalten, was zur Sekretion von IL-6 und CSF-1 führt. Isoform 3 zeigt die höchste Kapazität für die Liganden-Endozytose und Oberflächenexpression.
• Nach der proteolytischen Abspaltung wirkt die lösliche Form (sCD163) als entzündungshemmender Mediator und dient als diagnostischer Marker für die Makrophagenaktivierung bei verschiedenen entzündlichen Zuständen.
• Zur subzellulären Lokalisierung gehört die Zellmembran als Single-Pass-Typ-I-Transmembranprotein sowie die Sekretion als lösliche Ektodomäne nach Spaltung.
• CD163 wird spezifisch in Monozyten und reifen Gewebemakrophagen exprimiert, einschließlich der Kupffer-Zellen in der Leber, den roten Pulpa-Makrophagen in der Milz, den kortikalen Makrophagen im Thymus, den residenten Knochenmarksmakrophagen und den meningealen Makrophagen des Zentralnervensystems.
• Das Protein ist glykosyliert und enthält mehrere SRCR-Domänen, eine Transmembranhelix und einen cytoplasmatischen Schwanz. Es wird als Akutphasenprotein klassifiziert und ist an der Regulation von Entzündungsreaktionen beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser APC-konjugierte Antikörper ist für die durchflusszytometrische Detektion von humanem CD163 konzipiert. Da CD163 reichlich auf Monozyten und Makrophagen exprimiert wird, sollten Sie Gating-Strategien in Betracht ziehen, die diese Zellpopulationen einschließen.
• Für eine optimale Färbung führen Sie eine Antikörper-Titration durch, um die geeignete Konzentration zu bestimmen. APC ist ein helles Fluorochrom; sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Kompensationseinstellung, insbesondere bei gleichzeitiger Färbung mit anderen Fluorophoren.
• Da CD163 von der Zelloberfläche abgespalten wird, sollten Sie die Verwendung eines Anti-CD163-Antikörpers in Betracht ziehen, der die extrazelluläre Domäne erkennt, um eine zuverlässige Oberflächenfärbung zu gewährleisten. Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, sodass es wahrscheinlich an den extrazellulären Teil bindet.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Vitalitätsfarbstoffe in Ihrem Durchflusszytometrie-Panel, um tote Zellen oder unspezifische Bindungen auszuschließen. Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen experimentellen System, da die Expressionsniveaus mit der Zellaktivierung oder dem Krankheitszustand variieren können.

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