APC Anti-CD25 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01590

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD25

• Interleukin-2-Rezeptor-Untereinheit alpha (CD25), auch bekannt als p55, wird bei Mäusen durch das Il2ra-Gen kodiert und ist ein zentraler Bestandteil des hochaffinen IL-2-Rezeptors, der für eine korrekte Immunhomöostase essenziell ist.
• CD25 wird konstitutiv in hohen Mengen auf regulatorischen T-Zellen (TREGs) exprimiert und ist entscheidend für deren Funktion bei der Aufrechterhaltung der Immuntoleranz, indem es die Aktivierung und Expansion autoreaktiver T-Zellen unterdrückt.
• Das Protein ist ein einzeldurchgängiges Typ-I-Membranglykoprotein mit einer extrazellulären Region, die zwei Sushi-(CCP/SCR)-Domänen enthält, die die Ligandenbindung und Rezeptorkomplexbildung ermöglichen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die für die korrekte Faltung und Stabilität der extrazellulären Domäne wichtig sind.
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich an der Plasmamembran, mit einem kurzen zytoplasmatischen Schwanz, der an der Signaltransduktion nach Bindung von IL-2 beteiligt ist.
• CD25 wird auch vorübergehend auf aktivierten konventionellen T-Zellen, B-Zellen und NK-Zellen hochreguliert und dient als früher Aktivierungsmarker.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 22-236) von Maus-CD25 ab, wodurch Antikörper erzeugt werden, die den nativen Oberflächenrezeptor erkennen – dies ist gut für Anwendungen in der Durchflusszytometrie geeignet.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihre spezifische Zelltyp und experimentellen Bedingungen zu bestimmen, unter Verwendung relevanter positiver (z. B. aktivierte T-Zellen) und negativer Kontrollen.
• Oberflächenfärbung kann an lebenden, unfixierten Zellen durchgeführt werden; vermeiden Sie eine Fixierung mit Reagenzien, die das APC-Fluorophor oder die Epitopzugänglichkeit verändern können, es sei denn, dies wurde validiert.
• Erwägen Sie eine Co-Färbung mit Markern wie Foxp3 (intrazellulär) oder CD4, um Treg-Subpopulationen oder aktivierte T-Zellen in murinen Proben zu identifizieren.

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