Kaninchen-polykolonaler Anti-ZO-1-Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q07157

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ZO-1

• ZO-1 (Tight-Junction-Protein 1) ist ein Gerüstprotein aus der TJP-Familie, zu der auch TJP2 und TJP3 gehören. Es verbindet Transmembranproteine der Tight Junctions (Claudine, Junctional-Adhesion-Moleküle und Occludin) mit dem Aktinzytoskelett.
  Verwandte Referenzen: PMID:7798316 PMID:9792688
• Das Protein bildet mehrsträngige Kondensate, die sich zu einem Tight-Junction-Gürtel verlängern. Dieser wird über eine Interaktion mit PATJ apikal verankert und ist für die Epithelpolarisation, die Barrierebildung und die Lumenogenese essenziell.
• ZO-1 spielt eine regulatorische Rolle bei der Zellmigration, indem es CDC42BPB an die Vorderkante der Zelle dirigiert. Außerdem ist es wichtig für die Bildung von Podosomen und reguliert die Zelladhäsion sowie den Umbau der extrazellulären Matrix.
  Verwandte Referenzen: PMID:21240187 PMID:20930113
• Zusammen mit TJP2 und TJP3 ist es an der Verankerung und Stabilität des Transkriptionsfaktors DBPA an Zellverbindungen beteiligt, obwohl es nicht an dessen Transport zwischen Zellkern und Zytoplasma beteiligt ist.
• ZO-1 befindet sich an den Zellmembranen in Tight Junctions, Gap Junctions und Podosomen (Zellfortsätzen).
• Gewebespezifische Expression: Die Isoform mit Alpha-Anteil kommt in den meisten epithelialen Zellverbindungen vor, während die kurze Isoform in Endothelzellen sowie in spezialisierten epithelialen Zellverbindungen der Nierenglomeruli und Sertoli-Zellen nachgewiesen wird.
• ZO-1 enthält mehrere Proteinin­teraktionsdomänen, darunter PDZ-, SH3- und Guanylatkinase-ähnliche Domänen, und wird durch Phosphorylierung sowie alternatives Spleißen reguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen zielt auf die Aminosäuren 18–273 des humanen ZO-1 (N-terminaler Bereich mit den PDZ-Domänen). Erwägen Sie, die Spezifität mithilfe von Knockout- oder Knockdown-Kontrollen zu validieren.
• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 195 kDa zu erwarten. Verwenden Sie einen geeigneten Gelprozentsatz (z. B. 6–8 %) und optimieren Sie die Transferbedingungen für Proteine mit hohem Molekulargewicht.
• Bei der Immunfluoreszenz an in Paraffin eingebetteten Schnitten (IF-P) sollten Sie die Antigenrückgewinnung optimieren und die Lokalisation an Tight Junctions oder in Membranbereichen überprüfen.
• Dieser Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte und ist für Studien an Nagetiermodellen geeignet. Bestätigen Sie jedoch vor einer groß angelegten Anwendung das Signal im relevanten Gewebe.

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