Anti-ZFYVE9-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - O95405

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ZFYVE9-Funktion und -Lokalisierung

• ZFYVE9 (Zinkfinger-FYVE-Domain-haltiges Protein 9), auch bekannt als SARA (Smad-Anker für Rezeptoraktivierung), ist ein frühes endosomales Adapterprotein, das zur Familie der FYVE-Domain-haltigen Proteine gehört.
• Es fungiert hauptsächlich im TGF-β-Signalweg, indem es SMAD2 und SMAD3 an den TGF-β-Rezeptor auf der Membran des frühen Endosoms rekrutiert, deren Phosphorylierung und anschließenden Kerntransport erleichtert.
• Das Protein moduliert die transkriptionelle Aktivität des SMAD3/SMAD4-Komplexes und reguliert so die Downstream-Genexpression als Reaktion auf TGF-β-Stimulation.
• ZFYVE9 kann auch an der Internalisierung des TGF-β-Rezeptors beteiligt sein und zur Signaldämpfung sowie zum Rezeptor-Trafficking beitragen.
• Zellulär ist ZFYVE9 im Zytoplasma und spezifisch auf der zytoplasmatischen Seite der Membran des frühen Endosoms lokalisiert, wo seine FYVE-Domain an Phosphatidylinositol-3-phosphat bindet.
• Die Expression ist ubiquitär, aber im Gehirn findet sie sich vorwiegend in zerebrovaskulären glatten Muskelzellen und reaktiven Astrozyten, was auf gewebsspezifische Rollen hindeutet.
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen und wird als Phosphoprotein klassifiziert, mit einer Zinkfingerdomäne, die die Koordination von Metallionen vermittelt und für seine endosomale Lokalisierung essentiell ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen entspricht den N-terminalen 260 Aminosäuren; dieser Bereich ist möglicherweise weniger konserviert über Spleißvarianten hinweg, daher validieren Sie die Detektion Ihrer Ziel-Isoform in relevanten Zelllysaten.
• Für Western Blots wird eine Bande nahe 156 kDa erwartet; verwenden Sie einen geeigneten Gel-Prozentsatz und Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine und schließen Sie eine Positivkontrolle wie HeLa- oder HEK293-Zelllysat ein.
• Im ELISA beschichten Sie mit rekombinantem ZFYVE9-Protein oder einem Peptid aus der Immunogensequenz; titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen, und bestätigen Sie die Spezifität mit einer unbeschichteten Vertiefung.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er mehrere Epitope erkennen; prüfen Sie bei Verwendung für quantitative Assays die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz und verwenden Sie immer geeignete Kontrollen.

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