Anti-YTHDF2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC, IF - Q9Y5A9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: YTHDF2-Funktion und -Lokalisierung

• YTHDF2 ist ein N6-Methyladenosin (m6A)-Reader-Protein, das spezifisch m6A-haltige RNAs bindet und deren Stabilität reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Es fördert den Abbau von m6A-mRNAs über CCR4-NOT-Desadenylierung oder Ribonuklease P/MRP-endoribonukleolytische Spaltung, abhängig vom molekularen Kontext. Verwandte Referenzen: PMID:27558897, PMID:30930054
• YTHDF-Paraloge (YTHDF1, YTHDF2, YTHDF3) teilen sich Ziel-mRNAs und wirken redundant beim mRNA-Abbau und der zellulären Differenzierung. Verwandte Referenzen: PMID:28106072, PMID:32492408
• Subzellulär lokalisiert YTHDF2 im Zytosol, in P-Bodies, Stress Granules und im Zellkern und durchläuft eine Flüssig-Flüssig-Phasentrennung, um membranlose Kompartimente zu bilden. Verwandte Referenzen: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Hoch exprimiert in induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs) und während der neuralen Differenzierung herunterreguliert, hemmt es die neurale Spezifikation, indem es den Abbau methylierter, neural-spezifischer mRNAs fördert. Verwandte Referenzen: PMID:32169943
• YTHDF2 reguliert auch den zirkadianen hepatischen Lipidstoffwechsel, die angeborene antivirale Immunität, den mitotischen Eintritt und die Spermatogenese über m6A-abhängigen mRNA-Abbau. Verwandte Referenzen: PMID:30428350, PMID:30559377, PMID:32267835
• Während einer Virusinfektion kann YTHDF2 die Genexpression und Replikation von SV40 und KSHV fördern, indem es m6A-modifizierte virale RNAs bindet. Verwandte Referenzen: PMID:29447282, PMID:29659627

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1–200) von humanem YTHDF2; berücksichtigen Sie diese Epitop-Lokalisierung bei der Planung von Multiplex-Assays oder bei der Verwendung von verkürzten Proteinstandards.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 62 kDa; schließen Sie geeignete positive Kontrolllysate (z.B. HeLa, HEK293T) ein und optimieren Sie die Proteinbeladung für einen klaren Nachweis.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC, IF-P) fixieren und permeabilisieren Sie Zellen entsprechend der zytosolischen und granulären Lokalisierung des Targets; validieren Sie die Färbemuster in bekannten positiven und negativen Zelllinien.
• Für die Immunhistochemie an Paraffinschnitten (IHC-P) testen Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z.B. Citratpuffer pH 6.0 oder EDTA pH 9.0) und titrieren Sie den Antikörper, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-YTHDF2, was translationale Studien in Nagetiermodellen ermöglicht; bestätigen Sie die Sequenzhomologie, wenn absolute Spezifität kritisch ist.
• Da YTHDF2 m6A-modifizierte RNAs bindet, erwägen Sie die Behandlung von Zellen mit Methylierungsinhibitoren oder RNase, wenn Sie die Signalspezifität in RNA-abhängigen Kontexten bewerten.

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