Anti-YTHDC1-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q96MU7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: YTHDC1-Funktion und -Lokalisierung

• YTHDC1 (YT521-B) ist ein YTH-Domänen enthaltendes Protein, das als Reader für N6-Methyladenosin (m6A)-Modifikationen an RNAs und einsträngigen DNAs fungiert.
• Es bindet spezifisch m6A-haltige mRNAs und reguliert das alternative Spleißen durch Rekrutierung der Spleißfaktoren SRSF3 und SRSF10, wodurch das Ein- oder Überspringen von Exons beeinflusst wird.
  Verwandte Referenzen: PM.25242552 PM.26318451 PM.26876937
• YTHDC1 erleichtert auch den nuklearen Export von m6A-modifizierten mRNAs durch Interaktionen mit SRSF3 und NXF1.
  Verwandte Referenzen: PM.28984244
• Im Zellkern lokalisiert YTHDC1 zu Nuclear Speckles, die Orte der prä-mRNA-Verarbeitung sind.
• Über das Spleißen hinaus ist es an der Homöostase von S-Adenosyl-L-Methionin durch Regulation der MAT2A-Expression und an der Xist-vermittelten X-Chromosomen-Inaktivierung beteiligt.
  Verwandte Referenzen: PM.27602518 (für Xist)
• YTHDC1 bindet auch m6A-haltige einsträngige DNA, was auf eine breitere Rolle bei der Nukleinsäurerkennung hindeutet.
  Verwandte Referenzen: PM.32663306
• Es ist essentiell für die Keimbahnentwicklung, erforderlich für die Entwicklung von Spermatogonien bei Männern und das Oozytenwachstum bei Weibchen, wahrscheinlich durch seine Spleißfunktionen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitinierung, wie durch UniProt-Schlüsselwörter angegeben.
• Unabhängig von seiner m6A-Reader-Aktivität stabilisiert YTHDC1 PPARG durch Verhinderung dessen ubiquitinvermittelten Abbaus und trägt zur Entwicklung des braunen Fettgewebes bei.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–74 am N-Terminus des humanen YTHDC1; diese Region kann über Arten hinweg konserviert sein, was die beobachtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) sollte eine Bande, die ca. 85 kDa (vorhergesagt) entspricht, nachgewiesen werden. Erwägen Sie die Verwendung eines 8–10% SDS-PAGE-Gels für eine optimale Auflösung.
• Aufgrund alternativen Spleißens können mehrere Isoformen beobachtet werden; validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen oder siRNA-Knockdown in der entsprechenden Zelllinie.
• Für ELISA kann die direkte oder indirekte Beschichtung mit dem rekombinanten Immunogen oder Zelllysaten menschlichen, murinen oder rattischen Ursprungs verwendet werden. Eine Titrierung sowohl des Beschichtungsantigens als auch des Antikörpers wird empfohlen.
• Verwenden Sie Standard-Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper und Detektionsreagenzien, die für Ihr Bildgebungs- oder Plattenlesersystem optimiert sind.

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