Anti-YAP1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P46937

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: YAP1-Funktion und -Lokalisierung

• YAP1 (Yes-associated protein 1), auch bekannt als YAP, YAP65 oder Yorkie-Homolog, ist ein Transkriptions-Coaktivator und -Corepressor. Es fungiert als kritischer downstream-Effektor des Hippo-Signalwegs, der die Organgröße kontrolliert und die Tumorbildung unterdrückt, indem er die Proliferation einschränkt und die Apoptose fördert. Verwandte Referenzen: PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750
• Im kanonischen Hippo-Signalweg phosphoryliert und aktiviert eine Kaskade aus den Kinasen STK3/MST2 und STK4/MST1 zusammen mit dem Gerüstprotein SAV1 die LATS1/2-Kinasen im Komplex mit MOB1. Aktive LATS1/2 phosphoryliert dann YAP1, sequestriert es im Zytoplasma und verhindert dessen nukleären Translokation, wodurch die Expression der Zielgene inhibiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733
• YAP1 moduliert die Transkription hauptsächlich durch Interaktion mit Transkriptionsfaktoren der TEAD-Familie. Diese Interaktion reguliert Gene, die das Zellwachstum, das anchorage-unabhängige Wachstum und die Induktion des epithelial-mesenchymalen Übergangs (EMT) steuern. Verwandte Referenzen: PMID:18579750
• YAP1 spielt eine Rolle bei der Mechanotransduktion: Es reguliert die Gewebespannung und die 3D-Gewebeform durch Kontrolle des kortikalen Aktomyosin-Netzwerks. Es wirkt über ARHGAP18, ein Rho-GTPase-aktivierendes Protein, das die F-Aktin-Polymerisation unterdrückt. Verwandte Referenzen: PMID:25778702
• Darüber hinaus unterdrückt YAP1 die Ciliogenese, indem es als Transkriptions-Corepressor für TEAD4 fungiert und die Zielgene AURKA und PLK1 herunterreguliert. Verwandte Referenzen: PMID:25849865
• YAP1 synergisiert mit WBP2, um die Aktivität des Progesteron-Rezeptors (PGR) zu verstärken. Verwandte Referenzen: PMID:16772533
• Es kann auch das C-terminale Fragment (CTF) von ERBB4 (Isoform 3) aktivieren.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern, Tight Junctions und die Zellmembran. YAP1-Isoformen, die durch alternatives Spleißen entstehen, zeigen eine gewebsspezifische Expression: Erhöhte Spiegel werden in einigen Leber- und Prostatakrebsen beobachtet, während Isoformen ohne die Transaktivierungsdomäne in striatalen Neuronen von Patienten mit Huntington-Krankheit gefunden werden. Das Protein unterliegt Phosphorylierung und Ubiquitinierung, und sein Molekulargewicht reicht von 36 bis 54 kDa (kanonische Sequenz ~54,5 kDa).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen für diesen Antikörper deckt die Aminosäuren 155–504 von menschlichem YAP1 ab, einen Bereich, der die TEAD-Bindungsdomäne und einen Teil der Transkriptionsaktivierungsdomäne umfasst. Dieses Design ist darauf ausgelegt, das gesamte YAP1-Protein zu erkennen und kann aufgrund der hohen Sequenzkonservierung in diesem Segment eine Kreuzreaktivität mit murinen Orthologen (Maus, Ratte) ermöglichen.
• Für Western Blotting (WB) sollten Sie Ganzzell-Lysate aus menschlichen, murinen oder Ratten-Zelllinien in Betracht ziehen; YAP1 wandert typischerweise als mehrere Bänder zwischen 36 und 54 kDa.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) validieren Sie den Antikörper in Geweben oder Zelltypen, die bekanntermaßen YAP1 exprimieren, wie z. B. Leber- oder Prostatakrebsproben. Beachten Sie, dass die Muster der nukleären/zytoplasmatischen Lokalisierung je nach Aktivität des Hippo-Signalwegs variieren können.
• Für Immunpräzipitation (IP) und ELISA optimieren Sie die Antikörperkonzentration und die Pufferbedingungen experimentell, da die Leistung je nach Probentyp und Zielmenge variieren kann.

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