Monoklonaler Anti-XPD/ERCC2-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P18074

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von XPD/ERCC2

• Das XPD/ERCC2-Protein ist eine ATP-abhängige 5'-3'-DNA-Helikase, die eine Kernkomponente des allgemeinen Transkriptions- und DNA-Reparaturfaktors IIH (TFIIH) darstellt. Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Nukleotid-Exzisionsreparatur (NER) und der Transkriptionsinitiation. Verwandte Referenzen: PMID:31253769, PMID:8413672, PMID:9771713
• Bei der transkriptionsgekoppelten NER erkennt XPD/ERCC2 geschädigte DNA-Basen und wird an UV-geschädigter DNA im Chromatin gebunden; die ATP-abhängige Helikaseaktivität ist essenziell für die Öffnung der DNA um die Läsion herum. Verwandte Referenzen: PMID:17466626, PMID:23352696, PMID:9771713
• Während der Transkriptionsinitiation durch RNA-Polymerase II fungiert XPD/ERCC2 als strukturelle Brücke zwischen dem CDK-aktivierenden Kinase (CAK)-Modul und dem Kern-TFIIH-Komplex, und seine Helikaseaktivität wird für die Promotoröffnung und das Promotorverlassen benötigt; zwischen NER- und Transkriptionskomplexen treten große Konformationsänderungen auf. Verwandte Referenzen: PMID:10024882, PMID:31253769, PMID:33902107, PMID:17466626
• Über seine Rolle bei der DNA-Reparatur und Transkription hinaus ist XPD/ERCC2 als Teil des mitotischen Spindel-assoziierten MMXD-Komplexes an der Chromosomensegregation beteiligt und reguliert die Aktivität des Vitamin-D-Rezeptors.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst den Zellkern, das Zytoplasma und das Zytoskelett (Spindel), was mit seinen Rollen bei Transkription, DNA-Reparatur und Mitose übereinstimmt.
• XPD/ERCC2 enthält einen 4Fe-4S-Eisen-Schwefel-Cluster und eine ATP-Bindungsdomäne; Mutationen sind mit Xeroderma pigmentosum, Cockayne-Syndrom und Trichothiodystrophie-Phänotypen assoziiert.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, und das Protein ist der Ubiquitin-Konjugation unterworfen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Sequenz innerhalb der Aminosäuren 600-700 von menschlichem XPD/ERCC2; beachten Sie, dass diese Region zwischen Arten konserviert sein kann, was zur beobachteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte beiträgt.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei etwa 87 kDa zu erwarten; validieren Sie die spezifische Bande durch den Vergleich mit bekannten Molekulargewichtsmarkern und die Verwendung geeigneter Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie an paraffineingebetteten Schnitten (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval-Protokoll für optimale Detektion erforderlich sein; es wird eine Vorversuchstestung mit Kontrollgeweben empfohlen.
• Für den ELISA kann der Antikörper zum Auffangen oder Nachweisen von XPD/ERCC2-Peptiden oder rekombinantem Protein verwendet werden; eine Optimierung der Beschichtungskonzentration und des Detektionsformats wird empfohlen.

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