Anti-XIAP Kaninchen-Monoklonaler Antikörper (KO-validiert) für WB, ELISA - P98170

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: XIAP-Funktion und -Lokalisation

• XIAP (X-chromosomal gebundener Inhibitor der Apoptose), auch bekannt als BIRC4, IAP3 oder hILP, ist ein Mitglied der Inhibitor-of-Apoptosis (IAP)-Familie, charakterisiert durch drei Baculovirus-IAP-Wiederholungsdomänen (BIR) und eine C-terminale RING-Typ-Zinkfingerdomäne.
• Dient als direkter und potenter Caspase-Inhibitor; es bindet an die aktiven Stellen von CASP3 und CASP7, blockiert den Substrateintritt und hält CASP9 in einem inaktiven monomeren Zustand, wodurch die Apoptose blockiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:11257230 PMID:11257231 PMID:12620238 PMID:16352606
• Fungiert als E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, vermittelt sowohl degradative als auch nicht-degradative Ubiquitinierung (einschließlich Lys-63-verknüpfter Ketten) von Zielen wie RIPK1, RIPK2, DIABLO/SMAC und MAP3K2/MEKK2 und moduliert dadurch NF-kB- und MAP-Kinase-Signalwege. Verwandte Referenzen: PMID:17560374 PMID:17967870 PMID:19473982
• Reguliert die angeborene Immunität durch Katalyse der Lys-63-verknüpften Polyubiquitinierung von RIPK2 stromabwärts von NOD1 und NOD2, wodurch RIPK2 in eine Gerüstplattform für den LUBAC-Komplex und die nachgeschaltete NF-kB- und MAP-Kinase-Aktivierung umgewandelt wird. Verwandte Referenzen: PMID:19667203 PMID:22607974 PMID:29452636
• Beteiligt an der Kupferhomöostase über Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau von COMMD1 und verstärkt die Chaperon-Aktivität von CCS gegenüber SOD1. Verwandte Referenzen: PMID:14685266 PMID:20154138
• Wirkt als positiver Regulator des Wnt-Signalwegs durch Ubiquitinierung von TLE-Transkriptions-Korepressoren (TLE1-4) und AES, was die Repression der TCF/LEF-vermittelten Transkription aufhebt und die Bildung des Beta-Catenin/TCF4-Komplexes ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:22304967
• Unterdrückt die Ripoptosom-Bildung durch Ubiquitinierung von RIPK1 und CASP8 und schützt so Zellen vor Caspase-abhängigem und -unabhängigem nekroptotischem Zelltod. Verwandte Referenzen: PMID:22095281
• Ubiquitär in Geweben exprimiert, jedoch in peripheren Blutleukozyten nicht nachweisbar; auf Proteinebene in Dickdarmkrypten nachgewiesen. Verwandte Referenzen: PMID:8654366 PMID:30389919
• Subzellulär sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert, was mit seinen vielfältigen funktionellen Rollen in Apoptose, Signalübertragung und Transkription übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 1-200 von humanem XIAP) umfasst die N-terminale Region, die die BIR-Domänen enthält. Diese Region ist entscheidend für die Interaktion von XIAP mit Caspasen und anderen Bindungspartnern; daher kann der Antikörper Epitope erkennen, die für funktionelle Studien wesentlich sind.
• Für den Western Blot wird basierend auf dem vorhergesagten Molekulargewicht von XIAP ein Band bei etwa 57 kDa erwartet. Aufgrund möglicher posttranslationaler Modifikationen (z.B. Phosphorylierung, Ubiquitinierung) oder Spaltprodukte können jedoch zusätzliche Banden beobachtet werden; validieren Sie dies in Ihrem Probensystem.
• Laut Herstellerangaben reagiert dieser Antikörper mit humanem, murinem und Rattus-XIAP. Für anwendungen über Speziesgrenzen hinweg (z.B. Maus- oder Rattenproben) sollten Reaktivität und Spezifität unter Ihren experimentellen Bedingungen überprüft werden.
• Der Antikörper ist KO-validiert, was auf eine hohe Wahrscheinlichkeit der Spezifität hinweist. Dennoch sollten Sie geeignete positive und negative Kontrollen (z.B. XIAP-Knockout-Lysate) in Ihren Assays einschließen.
• Für ELISA: Optimieren Sie die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung; das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, daher sollte ein ähnliches rekombinantes Protein als positive Kontrolle in Betracht gezogen werden.

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