Anti-WWP2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - O00308

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: WWP2-Funktion und -Lokalisierung

• WWP2, auch bekannt als NEDD4-ähnliche E3-Ubiquitin-Protein-Ligase WWP2, Atrophin-1-interagierendes Protein 2 (AIP2) oder WW-Domain-haltiges Protein 2, ist ein Mitglied der HECT-Typ-E3-Ubiquitin-Ligase-Familie. Das Gen unterliegt alternatives Spleißen, wodurch mehrere Isoformen entstehen.
• Fungiert als E3-Ubiquitin-Ligase, indem es Ubiquitin von einem E2-Enzym akzeptiert und auf spezifische Substrate überträgt. Es katalysiert die Polyubiquitinierung über Lys-63-Verknüpfungen und zielt dabei vorwiegend auf Substrate für den proteasomalen Abbau ab.
• In embryonalen Stammzellen ubiquitiniert WWP2 den Pluripotenzfaktor POU5F1 (OCT4) und fördert dessen Abbau, was zur Regulierung der Stammzellerhaltung und -differenzierung beiträgt.
• Ubiquitiniert auch EGR2 in T-Zellen, was zu dessen proteasomalem Abbau und zur Hemmung der aktivierungsinduzierten Zellapoptose führt, was eine Rolle bei der Immunregulation unterstreicht.
• Lokalisiert sich hauptsächlich im Zellkern, was seiner Funktion bei der Regulierung nukleärer Transkriptionsfaktoren und chromatinassoziierter Proteine entspricht.
• Wird in einem breiten Spektrum von Geweben nachgewiesen, einschließlich Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Muskel, Niere, Bauchspeicheldrüse, Milz und peripheren Blutzellen.
• Klassifiziert als Phosphoprotein und beteiligt an Wirt-Virus-Interaktionen, was seine regulatorische Komplexität unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem internen Bereich (aa 151-400) von menschlichem WWP2 und umfasst einen Teil der katalytischen HECT-Domäne. Dieses Design kann die Detektion sowohl der Volllänge als auch bestimmter trunkierter oder alternativ gespleißter Isoformen im Western Blot erleichtern.
• Optimieren Sie für die Western-Blot-Analyse die Antikörperverdünnung (z. B. 1:500–1:2000) und die Inkubationsbedingungen unter Verwendung geeigneter positiver Kontrolllysate (z. B. menschliche Zelllinien, die WWP2 exprimieren).
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können Chargenunterschiede bestehen; fügen Sie geeignete Kontrollen wie rekombinantes Protein oder siRNA-Knockdown/Knockout-Lysate hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• Berücksichtigen Sie bei ELISA-Anwendungen die Verwendung des rekombinanten Immunogens oder des gereinigten Proteins als Beschichtungsantigen und titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu ermitteln.
• Die Kreuzreaktivität ist für den Menschen bestätigt; die Reaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet und sollte für Ihr experimentelles System validiert werden, falls erforderlich.

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