Anti-WT1-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P19544

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: WT1-Funktion und -Lokalisierung

• WT1 bindet an die DNA-Sequenz 5'-GCG(T/G)GGGCG-3', um die Expression Zielgenen, einschließlich EPO, zu regulieren, und ist für die Entwicklung des Urogenitalsystems unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:7862533 PMID:17716689 PMID:25258363
• Das Protein zeigt je nach zellulärem Kontext sowohl Tumorsuppressor- als auch onkogene Funktionen.
• WT1 verfügt über mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Aktivitäten. Isoformen ohne das KTS-Motiv fungieren als Transkriptionsfaktoren, während solche mit KTS mRNA binden und an der RNA-Verarbeitung oder dem Spleißen teilnehmen können. Verwandte Referenzen: PMID:15520190 PMID:16934801
• Isoform 1 hat eine geringere DNA-Bindungsaffinität und kann RNA binden. Verwandte Referenzen: PMID:19123921
• WT1 ist vorwiegend im Zellkern lokalisiert, einschließlich Nukleolus, Nukleoplasma und Kernspeckles, kann aber auch im Zytoplasma gefunden werden.
• Es wird in der Niere und einer Teilmenge der hämatopoetischen Zellen exprimiert.
• Das Protein enthält Zinkfingerdomänen und nimmt an der RNA-Editierung, dem alternativen Spleißen und der UBL-Konjugation teil, was konsistent mit seinen Rollen in der Transkription und dem RNA-Stoffwechsel ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 49 kDa. Ziehen Sie die Verwendung von Proteaseinhibitoren in Betracht, um einen Abbau zu verhindern.
• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1-302), die in mehreren WT1-Isoformen vorhanden ist. Dieser Antikörper kann verschiedene Isoformen erkennen; validieren Sie die Bandenmuster unter Verwendung relevanter Zelllinien oder Gewebe.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval und fügen Sie geeignete Gewebekontrollen hinzu (z. B. Niere oder WT1-positive Tumoren).
• Verwenden Sie im ELISA den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz gemäß Standardprotokollen; bestätigen Sie die Spezifität mit rekombinantem WT1-Protein.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf einen potenziellen Nutzen in Nagetiermodellen hin; validieren Sie dies immer im spezifischen experimentellen System.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen, um die Integrität des Antikörpers zu erhalten.

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