Anti-WRN Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q14191

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: WRN-Funktion und -Lokalisierung

• WRN kodiert ein multifunktionelles Enzym mit magnesium- und ATP-abhängiger 3'–5' DNA-Helikaseaktivität auf partiell doppelsträngigen Substraten und 3'–5' Exonukleaseaktivität auf dsDNA mit einem 5'-Überhang (keine Aktivität auf ssDNA oder stumpfe dsDNA). Verwandte Referenzen: PMID:9224595, PMID:9288107, PMID:9611231, PMID:11863428
• Das Protein bindet bevorzugt an und entwindet alternative DNA-Sekundärstrukturen wie Replikationsgabeln, Holliday-Verbindungen und G-Quadruplex-DNA (z. B. d(CGG)n-Wiederholungen), was den Fortschritt der Replikationsgabel erleichtert und Genominstabilität verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:10212265
• WRN ist entscheidend für die Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen nach Gamma-Bestrahlung und für die Bildung von DNA-Replikationsfokuszentren; sein Abbau führt zu chromosomalen Brüchen und schwerer Genominstabilität. Verwandte Referenzen: PMID:9224595, PMID:9288107, PMID:9611231, PMID:33199508
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend im Zellkern, einschließlich Nukleolus, Nukleoplasma und chromosomalen Regionen, was seinen Funktionen im DNA-Stoffwechsel entspricht.
• WRN unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen (Acetylierung, Phosphorylierung, Ubiquitinierung), die wahrscheinlich seine Helikase-/Exonukleaseaktivitäten und Protein-Protein-Wechselwirkungen regulieren.
• Mutationen in WRN verursachen das Werner-Syndrom, eine autosomal-rezessive Erkrankung mit vorzeitigem Altern, die durch Genominstabilität und Krebsprädisposition gekennzeichnet ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 1223–1432) befindet sich in der C-terminalen Region außerhalb der konservierten Helikasedomäne, was potenziell die Kreuzreaktivität mit anderen RecQ-Familienmitgliedern verringert.
• Beim Western Blotting ist ein Band nahe 162 kDa zu erwarten; verwenden Sie einen Marker für hohe Molekulargewichte und ein Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6 % SDS-PAGE) für eine optimale Trennung.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in relevanten menschlichen Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293) unter Verwendung eines Knockdown-Kontrollen oder eines bekannten positiven Lysats.
• Optimieren Sie im ELISA die Beschichtung mit dem rekombinanten Immunogen oder dem全长-WRN-Protein und erwägen Sie ein kompetitives Format für eine höhere Spezifität.

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