Anti-WEE1 monoklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA - P30291

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: WEE1-Funktion und Lokalisierung

• WEE1 (Wee1-ähnliche Proteinkinase) ist eine nukleäre Tyrosinkinase, die als kritischer negativer Regulator des G2/M-Zellzyklusübergangs wirkt, indem sie den Cyclin B1-CDK1-Komplex phosphoryliert und hemmt.
  Verwandte Referenzen: PMID:15070733, PMID:7743995, PMID:8348613, PMID:8428596
• Sie phosphoryliert spezifisch CDK1 an Tyrosin-15 und verhindert so einen vorzeitigen Eintritt in die Mitose; ihre Aktivität erreicht in der S- und G2-Phase ihren Höhepunkt und nimmt ab, wenn Zellen in die Mitose eintreten, was mit ihrer Hyperphosphorylierung und anschließenden Degradation korreliert.
• WEE1 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert, wo es das Genom schützt, indem es den richtigen Zeitpunkt für den Mitoseeintritt sicherstellt.
• Das Protein enthält konservierte Kinase-, ATP-Bindungs- und Metallbindungsdomänen, die für Tyrosinkinasen typisch sind, und seine Aktivität wird durch Phosphorylierung und Ubiquitinierung moduliert.
• Alternative Namen für WEE1 sind WEE1A, WEE1hu und Wee1A-Kinase; die humane Genkennung ist 7465.
• Die mit WEE1 assoziierten UniProt-Schlüsselwörter umfassen Zellzyklus, Mitose, Zellkern, Kinase, Phosphoprotein, alternatives Spleißen und Ubiquitin-Konjugation, was seine regulatorischen Funktionen widerspiegelt.
• Das humane WEE1-Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~71,6 kDa (UniProt) und ist mit dem 72 kDa-Produkt konsistent.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 von humanem WEE1 (NP_003381.1) entspricht. Diese N-terminale Region könnte für den Nachweis sowohl der vollständigen Länge als auch von Spleißvarianten geeignet sein, eine Validierung im relevanten Proben-System wird jedoch empfohlen.
• Für IHC-P-Anwendungen sollten Sie eine Reihe von Antikörperverdünnungen und Antigen-Retrieval-Methoden testen, da ein nukleäres Färbemuster erwartet wird; die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus-WEE1 könnte Studien in Mausmodellen erleichtern.
• Für ELISA wird die Optimierung von Beschichtungsantigen und Nachweisbedingungen empfohlen; die Kombination mit einem geeigneten Capture- oder Detektionsantikörper kann die Assay-Empfindlichkeit erhöhen.
• Da die WEE1-Proteinspiegel während des Zellzyklus schwanken, kann die Synchronisierung von Zellkulturen und die zeitliche Abstimmung der Probenentnahme die Nachweiskonsistenz verbessern.

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