Anti-WDR45-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y484

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: WDR45-Funktion und -Lokalisierung

• WD-Repeat-Domain-Phosphoinositid-interagierendes Protein 4 (WDR45), auch bekannt als WIPI4, ist eine Komponente der Autophagie-Maschinerie. Es spielt eine kritische Rolle beim Abbau von zytoplasmatischem Material, indem es die Bildung von Autophagosomen und den Transport zu Lysosomen fördert. Verwandte Referenzen: PMID:23435086, PMID:28561066
• WDR45 bindet Phosphatidylinositol-3-phosphat (PtdIns3P) und wird an PtdIns3P-haltige Membranen rekrutiert, wo es die Größe der Autophagosomen stromabwärts von WIPI2 reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:28561066
• Zusammen mit WIPI1 erleichtert WDR45 den ATG2-vermittelten Lipidtransfer, indem es die Assoziation von ATG2 mit PI3P-reichen Membranen verstärkt, ein entscheidender Schritt bei der Biogenese von Autophagosomen. Verwandte Referenzen: PMID:31271352
• Das WDR45-Gen gehört zur WD-Repeat-Proteinfamilie und wird alternativ gespleißt, was zu mehreren Transkriptvarianten führt.
• WDR45 lokalisiert zu präautophagosomalen Strukturen und dem Zytoplasma, was seiner Rolle bei der frühen Bildung von Autophagosomen entspricht.
• Mutationen in WDR45 sind mit Neurodegeneration in Verbindung mit Eisenakkumulation im Gehirn (NBIA) assoziiert, was seine Bedeutung für die neuronale Homöostase unterstreicht.
• WDR45 ist ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Werten in Skelettmuskulatur und Herz und einer reduzierten Expression in Leber, Plazenta und bestimmten Tumoren (z. B. Bauchspeicheldrüsen- und Nierenkrebs).
• Das Protein enthält mehrere WD-Repeats und besitzt Lipidbindungsaktivität, die für seine Funktion bei der Membranerkennung und Autophagieregulation unerlässlich ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 35–148 von menschlichem WDR45 ab, eine Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blots beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~40 kDa; erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen (z. B. HEK293- oder HeLa-Zelllysate) und validieren Sie die Bandspezifität.
• Für die Immunfluoreszenz/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um autophagosomale Strukturen zu erhalten; die Induktion der Autophagie (z. B. durch Hunger oder Rapamycin) kann das Signal verstärken.
• ELISA-Assays können eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und die Einbeziehung bekannter WDR45-positiver und negativer Proben erfordern.
• Da WDR45 an der Autophagie beteiligt ist, erwägen Sie die Validierung des Nachweises in relevanten Krankheitsmodellen oder unter autophagiemodulierenden Bedingungen.

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