Anti-WDR4 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ChIP, ELISA - P57081

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: WDR4-Funktion und Lokalisierung

• WDR4 ist die nicht-katalytische Komponente des METTL1-WDR4-Methyltransferase-Komplexes und katalysiert die N(7)-Methylguanin-Bildung in tRNAs, mRNAs und miRNAs (PubMed:12403464, PubMed:31031083, PubMed:31031084). Verwandte Referenzen: PMID:12403464 PMID:31031083 PMID:31031084
• Als Gerüstprotein bindet WDR4 tRNA-Substrate und lenkt METTL1, um Guanin an Position 46 (m7G46) in tRNAs mit einem 5'-RAGGU-3'-Motiv zu methylieren, was die tRNA-Tertiärstruktur stabilisiert und tRNAs vor Abbau schützt (PubMed:36599982, PubMed:36599985, PubMed:34352206, PubMed:34352207). Verwandte Referenzen: PMID:36599982 PMID:36599985 PMID:34352206 PMID:34352207
• WDR4-METTL1 methyliert auch interne Stellen in einer Untergruppe von mRNAs und spezifischen miRNAs wie let-7 und beeinflusst deren Prozessierung und Stabilität (PubMed:31031084, PubMed:37379838, PubMed:31031083). Verwandte Referenzen: PMID:31031084 PMID:37379838 PMID:31031083
• Über seine Methyltransferase-Funktion hinaus trägt WDR4 zur Genomstabilität bei, indem es an DNA-Replikationsstellen lokalisiert und die Endonuklease-Aktivität von FEN1 reguliert (PubMed:26751069). Verwandte Referenzen: PMID:26751069
• WDR4 lokalisiert hauptsächlich im Zellkern und assoziiert mit Chromosomen, was mit seinen Rollen bei der RNA-Modifikation und DNA-Replikation übereinstimmt.
• WDR4 unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, und krankheitsassoziierte Varianten werden mit Entwicklungs- und neurologischen Störungen wie Epilepsie und geistiger Behinderung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting ist ein spezifisches Band bei etwa 45kDa zu erwarten. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen (z.B. WDR4-überexprimierende oder Knockout-Lysate) ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen und validieren Sie die Färbemuster in bekannten WDR4-exprimierenden Geweben. Verwenden Sie Isotyp-Kontrollen, um den Hintergrund zu beurteilen.
• Bei ChIP-Assays berücksichtigen Sie, dass WDR4 mit Chromatin und DNA-Replikationsstellen assoziiert; designen Sie Primer, die auf genomische Regionen von Interesse abzielen, und schließen Sie negative Kontroll-Loci ein.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper für den direkten oder auf Capture basierenden Nachweis eingesetzt werden; standardisieren Sie Beschichtungskonzentrationen und blockieren Sie unspezifische Bindung.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 250–350; daher erkennt der Antikörper ein internes Epitop, das bei humanem, Maus- und Ratten-WDR4 konserviert ist. Überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem Modellsystem.

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