Anti-VPS54 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9P1Q0

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von VPS54

• VPS54 (Vakuoläres, am Proteinsortieren beteiligtes Protein 54), auch bekannt als Hepatozelluläres-Karzinom-Protein 8 (HCC8), Tumorantigen SLP-8p und PPP1R164, ist eine Komponente des GARP-Komplexes (Golgi-assoziiertes retrogrades Protein).
• Es fungiert als Komponente des GARP-Komplexes, der den retrograden Transport von frühen und späten Endosomen zum Trans-Golgi-Netzwerk (TGN) vermittelt.
• Der GARP-Komplex ist für den Kreislauf der Mannose-6-phosphat-Rezeptoren zwischen dem TGN und den Endosomen erforderlich, der für die korrekte lysosomale Sortierung von Säurehydrolasen wie CTSD entscheidend ist.
• Innerhalb des GARP-Komplexes ist VPS54 erforderlich, um den Komplex am TGN zu verankern; es ist nicht am endozytischen Recycling beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:18367545 PMID:25799061
• Subzelluläre Lokalisierung: Golgi-Apparat, Membran des Trans-Golgi-Netzwerks.
• Posttranslationale Modifikationen und Merkmale: Phosphoprotein, enthält Coiled-Coil-Domänen und unterliegt alternativem Spleißen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 111 kDa (UniProt-Annotation: 110.589 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 420–720, einer Region, die wahrscheinlich Coiled-Coil-Motive umfasst, die für den Zusammenbau des Komplexes wichtig sind; berücksichtigen Sie diese Epitopinformationen bei der Entwicklung kompetitiver Assays oder von Verkürzungsstudien.
• Für Western-Blot-Analysen kann eine Verdünnungsreihe erforderlich sein, um endogenes VPS54 beim vorhergesagten Molekulargewicht von 111 kDa nachzuweisen; validieren Sie dies im relevanten Probensystem.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um die Lokalisierung an der Golgi-/TGN-Membran zu erhalten; eine Ko-Färbung mit TGN-Markern (z. B. TGN46) wird empfohlen.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis eingesetzt werden; stellen Sie sicher, dass rekombinante Protein- oder Peptidkontrollen hinsichtlich der korrekten Quantifizierung mit der Immunogenregion übereinstimmen.
• Die Kreuzreaktivität mit humanem und murinem VPS54 wurde bestätigt; für andere Arten sollten Sie einen Sequenzvergleich und Vorprüfungen durchführen.

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