Anti-VPS35 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q96QK1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: VPS35-Funktion und -Lokalisation

• VPS35 (Vacuolar protein sorting-associated protein 35) ist eine Kernkomponente des retromer cargo-selective complex (CSC), essentiell, um die lysosomale Degradation ausgewählter Transmembran-Cargoproteine zu verhindern; es wird für den retrograden Transport von IGF2R und SLC11A2 von Endosomen zum TGN und für die pIgR-pIgA-Transzytose benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:15078903, PMID:15247922, PMID:20164305
• Der Retromer CSC interagiert mit verschiedenen Sorting Nexinen (SNX3, SNX27, SNX-BAR), um spezialisierte Transportwege zu definieren; beispielsweise vermittelt SNX3-Retromer den retrograden Endosom-zu-TGN-Transport von WLS. Verwandte Referenzen: PMID:30213940
• VPS35 erleichtert die Rekrutierung des WASH-Komplexes und von TBC1D5 an endosomale Membranen und verknüpft so die Retromer-Funktion mit Aktin-Polymerisation und regulatorischem Protein-Cycling. Verwandte Referenzen: PMID:22070227, PMID:28892079, PMID:20923837
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma, die Membran und endosomale Kompartimente (frühe und späte Endosomen), was mit seiner Rolle im intrazellulären Transport übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (Stichwort "Phosphoprotein"), was auf eine regulatorische Kontrolle der Retromer-Assemblierung und Cargo-Sortierung hindeutet.
• Die Gewebeexpression ist ubiquitär, mit hohen Spiegeln in Herz, Gehirn, Plazenta, Skelettmuskel, Milz, Thymus, Hoden, Eierstock, Dünndarm, Niere und Kolon.
• Mutationen in VPS35 sind mit autosomal-dominanter spät einsetzender Parkinson-Krankheit (PARK17) assoziiert, was auf eine Retromer-Dysfunktion bei Neurodegeneration hindeutet.
• Darüber hinaus spielt VPS35 eine Rolle bei Wirt-Virus-Interaktionen; der Retromer CSC vermittelt den Austritt von humanen Papillomviren aus frühen Endosomen während der Infektion.

Experimentelle Leitfäden und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-250) von humanem VPS35, die hochkonserviert ist; die Kreuzreaktivität mit der Maus wurde bestätigt, und Reaktivität mit anderen Spezies ist aufgrund von Sequenzhomologie möglich.
• Für den Western Blot (WB) ist eine Bande von etwa 92 kDa zu erwarten. Aufgrund der ubiquitären Proteinexpression sind positive Signale in verschiedenen humanen und murinen Zelllysaten zu erwarten (z.B. HeLa, HEK293 oder Mausgehirngewebe); validieren Sie dies in Ihrem spezifischen Proben-System.
• Für ELISA sollten Sie entweder die direkte Beschichtung mit rekombinantem VPS35 oder Capture-Assays in Betracht ziehen; titrieren Sie den Antikörper, um optimale Arbeitsverdünnungen zu ermitteln.
• Für Immunfluoreszenz oder Immunhistochemie beachten Sie, dass es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt; aufgrund möglicher Kreuzreaktivität mit anderen VPS-Familienmitgliedern oder Retromer-Komponenten kann eine zusätzliche Validierung erforderlich sein.
• Bei -20°C in Aliquots lagern und wiederholte Gefrier-Tau-Zyklen vermeiden, um die Aktivität zu erhalten.

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