Anti-VPRBP-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q9Y4B6

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von VPRBP (DDB1- und CUL4-assoziierter Faktor 1)

• Das DCAF1-Gen kodiert VPRBP (auch bekannt als DDB1- und CUL4-assoziierter Faktor 1, HIV-1-Vpr-bindendes Protein oder Serin/Threonin-Proteinkinase VPRBP), ein großes Protein mit mehreren Isoformen (beobachtet bei 118, 168 und 169 kDa), die durch alternatives Spleißen entstehen. Es gehört zur DCAF-Familie, die durch WD40-Repeats und eine Chromodomäne charakterisiert ist.
• VPRBP fungiert als Substraterkennungseinheit des CUL4A-RBX1-DDB1-E3-Ubiquitinligasekomplexes (DCX-Komplex). Dieser Komplex vermittelt die Ubiquitinierung und den proteasomalen Abbau von Zielproteinen wie NF2 und methylierten Substraten, die über die Chromodomäne erkannt werden. Zugehörige Referenz: PMID:23063525
• Als Bestandteil des EDVP-Komplexes steuert VPRBP die Ubiquitinierung von TERT, was zu einer Hemmung der Telomerase führt, sowie von CCP110, wodurch die Zentrosombiologie beeinflusst wird. Zugehörige Referenzen: PMID:19287380 PMID:23362280 PMID:28242748 PMID:34259627
• VPRBP wirkt als atypische Serin/Threonin-Kinase, die Histon H2A im nukleosomalen Kontext spezifisch an Thr-120 (H2AT120ph) phosphoryliert, wodurch die Transkription von Tumorsuppressorgenen reprimiert und zur Onkogenese beigetragen wird. Zugehörige Referenz: PMID:24140421
• Durch die Interaktion mit LLGL1 und LLGL2 nimmt VPRBP während des JNK-vermittelten apoptotischen Prozesses bei Zellkonkurrenz teil und beeinflusst dadurch die Gewebehomöostase. Zugehörige Referenz: PMID:20644714
• Auf subzellulärer Ebene ist VPRBP im Zytoplasma, im Zellkern und an den Zentrosomen (Mikrotubuli-organisierenden Zentren) lokalisiert, was mit seinen Funktionen bei der nukleären Ubiquitinierung und der zytoplasmatischen Signalübertragung übereinstimmt.
• VPRBP wird ubiquitär exprimiert, was seine grundlegenden Funktionen bei der Kontrolle des Zellzyklus, der Chromatinregulation und den Stressreaktionen widerspiegelt.
• Im Kontext einer Virusinfektion wird VPRBP von HIV-1 Vpr und HIV-2 Vpx für eigene Zwecke genutzt, um die Aktivität der zellulären E3-Ligase umzuleiten. Dies führt zum Abbau von Wirtsproteinen und erleichtert die Virusreplikation.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1058–1396 in der C-terminalen Region von VPRBP. Eine Validierung des Nachweises verschiedener Isoformen und der möglichen Kreuzreaktivität mit anderen Mitgliedern der DCAF-Familie sollte in Betracht gezogen werden.
• Beim Western Blot können aufgrund von alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen mehrere Banden (118, 168 und 169 kDa) sichtbar werden. Verwenden Sie geeignete Proteinmarker und validieren Sie das Ergebnis im relevanten Zell- oder Gewebelysatsystem.
• Für ELISA sollten die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörpertitration empirisch optimiert werden; aufgrund der polyklonalen Beschaffenheit kann eine stringente Blockierung erforderlich sein, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus wurde berichtet. Bestätigen Sie jedoch die Spezifität im vorgesehenen Maustyp der Probe, insbesondere angesichts möglicher Sequenzvariationen.

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