Anti-von-Willebrand-Faktor (VWF) Kaninchen-Polyclonalantikörper für WB/IHC-P/ELISA - P04275

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des von-Willebrand-Faktors

• Der von-Willebrand-Faktor (VWF) ist ein multimeres Plasmaglykoprotein, das für die Hämostase entscheidend ist. Er dient als molekulare Brücke zwischen subendothelialem Kollagen und dem thrombozytären GPIb-IX-V-Rezeptor, um die Thrombozytenadhäsion an Stellen von Gefäßverletzungen zu fördern.
• VWF fungiert außerdem als Chaperon für den Gerinnungsfaktor VIII, stabilisiert dessen heterodimere Struktur und schützt ihn vor vorzeitiger Clearance aus dem Plasma.
• Kodiert durch das VWF-Gen (GenID: 7450) auf Chromosom 12 wird das Protein als 2813-Aminosäuren-Präproprotein synthetisiert, das umfangreiche posttranslationelle Verarbeitungen einschließlich Glykosylierung und Multimerisierung durchläuft.
• Das Protein wird sezerniert und befindet sich extrazellulär, wo es Teil der extrazellulären Matrix ist und im Plasma zirkuliert.
• VWF enthält mehrere funktionelle Domänen, darunter die A-Domänen, die die Interaktion mit dem Thrombozyten-Glykoprotein Ib und Kollagen vermitteln.
• Mutationen im VWF-Gen sind mit der von-Willebrand-Krankheit (VWD) assoziiert, einer Blutungsstörung, die durch eine defekte Thrombozytenadhäsion und verringerte Faktor-VIII-Spiegel charakterisiert ist.
• Durch alternatives Spleißen der VWF-mRNA entstehen mehrere Isoformen, wobei die funktionelle Bedeutung vieler Varianten noch erforscht wird.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 2645-2813, einer C-terminalen Region von VWF. Diese Sequenz kann alle wichtigen Isoformen in denaturierenden Western-Blot-(WB)-Anwendungen nachweisen.
• Für IHC-P sollten Methoden zur Antigenretrieval und die Antikörperverdünnung optimiert werden, da VWF reichlich im Gefäßendothel und in Thrombozyten exprimiert ist.
• Im ELISA empfehlen wir, diesen polyklonalen Antikörper mit einem Fangantikörper zu paaren, der auf eine nicht überlappende Epitop zielt, um Konkurrenz zu vermeiden.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts (309 kDa) von reifem VWF verwenden Sie bitte SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz (5–6 %) und verlängerte Transferzeiten, um eine effiziente Detektion zu gewährleisten.
• Aufgrund der multimeren Natur von VWF werden Reduktionsmittel (z. B. DTT) empfohlen, um monomere Formen im WB aufzutrennen; nicht reduzierende Bedingungen können multimere Leitern sichtbar machen.

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