Anti-Vinculin polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P18206

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Vinculin-Funktion und Lokalisation

• Vinculin ist ein Aktinfilament (F-Aktin)-bindendes Protein, das entscheidend für die Zell-Matrix-Adhäsion und Zell-Zell-Adhäsion ist. Es reguliert die E-Cadherin-Oberflächenexpression und verstärkt die Mechanosensorik.
• Eine muskelspezifische Spleißvariante, Metavinculin, wird aus dem VCL-Gen generiert und spielt eine spezialisierte Rolle im Herz- und Skelettmuskel.
• Vinculin lokalisiert sich an fokalen Adhäsionen, Adhärenzverbindungen, Podosomen und der perinukleären Region und verbindet das Aktin-Zytoskelett über die Sarkolemm-Assoziation mit der Plasmamembran.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Palmitoylierung und Phosphorylierung, von denen angenommen wird, dass sie seine adhäsiven Funktionen und die Interaktion mit Bindungspartnern regulieren.
• Durch die Überbrückung von Adhäsionsstellen zum Aktin-Netzwerk beeinflusst Vinculin die Zellmorphologie und -lokomotion, Prozesse, die für die Wundheilung und Entwicklung wesentlich sind.
• Mutationen im VCL-Gen werden mit erblichen Kardiomyopathien in Verbindung gebracht, was seine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Integrität des Herzmuskels unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot liegt das erwartete Molekulargewicht für Vinculin bei etwa 124 kDa; in Muskelproben kann eine höhere Bande um 150 kDa nachgewiesen werden, die Metavinculin entspricht.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz oder Immunozytochemie sollten die Zellen permeabilisiert werden, um Vinculin an fokalen Adhäsionen sichtbar zu machen; eine Fixierung mit Paraformaldehyd ist im Allgemeinen geeignet.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in Ihrem Probensystem nach Möglichkeit unter Verwendung von Knockout- oder Knockdown-Kontrollen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie den Beschichtungspuffer und die Detektionsbedingungen optimieren, um sie an das spezifische Immunoassay-Format anzupassen.

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