Anti-Vinculin monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P18206

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Vinculin-Funktion und -Lokalisation

• Vinculin ist ein hochkonserviertes Aktinfilament (F-Aktin)-bindendes Protein mit einer muskel-spezifischen Splice-Variante, bekannt als Metavinculin (MV).
• Es spielt eine zentrale Rolle bei Zell-Matrix- und Zell-Zell-Adhäsionen, indem es Integrin-Adhäsionsrezeptoren oder Cadherin-Komplexe mit dem kortikalen Aktin-Zytoskelett verbindet.
• Vinculin reguliert die Zelloberflächenexpression von E-Cadherin und verstärkt die Mechanosensorik durch den E-Cadherin-Komplex an Adhärenzverbindungen.
• Das Protein lokalisiert an mehreren subzellulären Stellen, einschließlich Fokaladhäsionen, Adhärenzverbindungen, dem kortikalen Zytoskelett, Podosomen und der perinukleären Region.
• In Muskelzellen wird Metavinculin spezifisch exprimiert und assoziiert mit dem Sarkolemm.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Palmitoylierung, die seine Funktion und Lokalisation modulieren.
• Mutationen in Vinculin sind mit Kardiomyopathien assoziiert, und das Protein ist an Zellmorphologie und -bewegung beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (aa 1000-1100); für eine optimale Detektion sollte sichergestellt werden, dass während der Probenvorbereitung und Fixierung eine Epitopmaskierung vermieden wird.
• Beim Western Blotting (WB) migriert Vinculin bei etwa 124 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines Gels mit mittlerem Polyacrylamidanteil für eine klare Auflösung.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Antigen-Retrieval- und Permeabilisierungsbedingungen validiert werden, um konsistente Färbemuster zu erzielen.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben kann der Antikörper für vergleichende Studien über diese Spezies eingesetzt werden; bestätigen Sie die Reaktivität im relevanten Modellsystem.
• Bei Verwendung von ELISA sollten die Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen evaluiert werden, um den Hintergrund zu minimieren und das Signal-Rausch-Verhältnis zu maximieren.

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