Anti-Vinculin [KD-validiert] monoklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – P18206

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Vinculin

• Vinculin ist ein durch das VCL-Gen codiertes Protein, das an Aktinfilamente (F-Aktin) bindet; eine muskelspezifische Isoform, Metavinculin (MV), wird durch alternatives Spleißen erzeugt.
• Es ist sowohl für die Zell-Matrix-Adhäsion als auch für die Zell-Zell-Adhäsion essenziell, reguliert die Expression von E-Cadherin an der Zelloberfläche und verstärkt die Mechanosensorik des E-Cadherin-Komplexes.
• Vinculin ist in mehreren subzellulären Strukturen lokalisiert, darunter Adherens Junctions, fokale Adhäsionen, das Zytoskelett, das Sarkolemm, Podosomen und das perinukleäre Zytoplasma.
• Das Protein unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und Palmitoylierung, die wahrscheinlich seine Aktivität und Membranassoziation modulieren.
• Krankheitsvarianten in VCL stehen mit Kardiomyopathien in Verbindung; Metavinculin ist insbesondere an Muskelerkrankungen wie der dilatativen Kardiomyopathie (CMD1W) und der hypertrophen Kardiomyopathie (CMH15) beteiligt.
• Vinculin spielt eine Rolle bei der Zellmorphologie und Zellbewegung und trägt während der Migration zur dynamischen Umgestaltung des Aktinzytoskeletts bei.
• Strukturelle Untersuchungen zeigen, dass Vinculin sich wiederholende Domänen enthält, die Interaktionen mit mehreren Bindungspartnern ermöglichen und als molekulares Gerüst an Adhäsionsstellen dienen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1–258 des menschlichen Vinculins (N-terminaler Bereich); daher kann der Antikörper in Muskelproben sowohl Vinculin voller Länge (~124 kDa) als auch die Metavinculin-Isoform (~150 kDa) nachweisen.
• Für Western Blotting empfehlen wir die Verwendung geeigneter Größenmarker und Ladekontrollen. Erwägen Sie die Verwendung von Lysaten aus menschlichen, murinen oder Ratten-Zelllinien, die Vinculin exprimieren. Die KD-Validierung bestätigt die Spezifität, dennoch sollten Endanwender die Spezifität in ihrem eigenen experimentellen System überprüfen.
• Bei Immunfluoreszenz und Immunhistochemie erscheint Vinculin typischerweise als klar abgegrenzte Punkte an fokalen Adhäsionen und als kontinuierliche Bänder an Zell-Zell-Verbindungen. Fügen Sie Negativkontrollen (z. B. Vinculin-Knockdown-Zellen) sowie eine Kofärbung mit Adhäsionsmarkern ein, um die Lokalisation zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper sowohl in direkten als auch in Sandwich-Formaten eingesetzt werden; optimieren Sie Beschichtungskonzentrationen und Nachweisbedingungen empirisch.

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