Anti-Villin1 Monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P09327

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Villin1-Funktion und -Lokalisierung

• Villin-1 (VIL, D2S1471) ist ein epithelzellspezifisches, Ca2+-reguliertes Aktin-modifizierendes Protein, das die Reorganisation von Aktin in Mikrovilli moduliert.
• Es zeigt multiple aktinregulatorische Aktivitäten, einschließlich Nukleation, Bündelung, Capping und Severing, die durch Ca2+-, PIP2- und LPA-Bindung reguliert werden.
• Die Bindung an LPA verstärkt die SRC-vermittelte Phosphorylierung und hemmt die aktinmodifizierenden Aktivitäten, während PIP2 das Capping/Severing hemmt, aber die Bündelung fördert.
• Villin-1 reguliert die Morphologie, Migration, Invasion und den Apoptose von Epithelzellen; es schützt vor DSS-induzierter Apoptose durch Erhaltung der mitochondrialen Integrität.
• Es verstärkt die HGF-induzierte Motilität, Chemotaxis und Wundheilung von Epithelzellen.
• Während einer S. flexneri-Infektion erleichtert seine Aktin-Severing-Aktivität die intrazelluläre Bewegung und Ausbreitung der Bakterien.
• Subzellulär lokalisiert im Zytoplasma, Zytoskelett und aktinreichen Fortsätzen: Mikrovilli, Lamellipodien, Ruffles und Filopodien-Spitzen.
• Gewebsspezifität: Hauptkomponente der Mikrovilli in den Epithelien des Dünndarms und der Nierenproximaltubuli; auch exprimiert in den kanalikulären Mikrovilli von Hepatozyten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes humanes Villin1-Protein; der resultierende monoklonale Antikörper kann lineare und konformationelle Epitope erkennen und unterstützt sowohl denaturierende (WB) als auch native (IHC, ELISA) Anwendungen.
• Für den Western Blot wird ein reduzierendes SDS-PAGE empfohlen; erwarten Sie eine Hauptbande bei ~93 kDa. Validieren Sie die Spezifität mit positiven (z. B. Darm- oder Nierenepithel-Lysaten) und negativen Kontrollzelllinien.
• Für die Immunhistochemie auf Paraffinschnitten können Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) erforderlich sein; validieren Sie an Geweben mit hoher Villin1-Expression wie Dünndarm oder Niere.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-Villin1, was die Verwendung in Nagetiermodellen ermöglicht; bestätigen Sie die speziespezifische Reaktivität durch Vergleich mit bekannten Expressionsmustern.
• Für ELISA kann in Betracht gezogen werden, den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz mit rekombinantem Villin1 oder Zell-/Gewebeextrakten zu verwenden; kombinieren Sie ihn mit einem nicht überlappenden Anti-Villin1-Antikörper, falls verfügbar.

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