Anti-Villin-1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P09327

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Villin-1

• Villin-1 (VIL1, auch bekannt als VIL oder D2S1471) ist ein epithelzellspezifisches aktinmodifizierendes Protein, das beim Menschen durch das VIL1-Gen kodiert wird.
• Es reguliert die Aktindynamik durch Nukleation der Aktinpolymerisation, Bündelung von Aktinfilamenten, Kappung der barbierten Enden und Spaltung von Filamenten; diese Aktivitäten werden durch Ca²⁺, Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) und Lysophosphatidsäure (LPA) moduliert.
• Villin-1 ist ein wichtiger Strukturbestandteil der Mikrovilli in Epithelzellen des Darms und der proximalen Nierentubuli und kommt auch in den kanalikulären Mikrovilli von Hepatozyten vor.
• Subzellulär lokalisiert es sich im Zytoplasma, am Zytoskelett sowie an den Spitzen und Schäften mehrerer aktinreicher Zellvorsprünge, darunter Mikrovilli, Filopodien, Lamellipodien und Membranruffeln.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Erhaltung der Epithelzellmorphologie, der Förderung von Zellmigration und -invasion sowie dem Schutz vor Apoptose im Magen-Darm-Epithel, wahrscheinlich durch die Erhaltung der mitochondrialen Integrität.
• Villin-1 verstärkt die durch Hepatozytenwachstumsfaktor (HGF) induzierte Epithelzellmotilität, Chemotaxis und Wundheilung.
• Bei einer Infektion mit Shigella flexneri wird seine Aktin-spaltende Aktivität genutzt, um die bakterielle Motilität und Ausbreitung innerhalb der Wirtszelle zu verstärken.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und Phosphorylierung; die Bindung von LPA löst eine SRC-vermittelte Phosphorylierung aus, die alle aktinmodifizierenden Funktionen hemmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus dem volllängen humanen Villin-1-Protein (Aminosäuren 1‑827), wodurch der Antikörper potenziell sowohl nicht phosphorylierte als auch phosphorylierte Formen erkennen kann; validieren Sie den Nachweis der relevanten Phosphorylierungszustände in Ihrem Modellsystem.
• Für Western Blot (WB) erwarten Sie eine einzelne Bande bei etwa 93 kDa; der Antikörper reagiert mit Proben von Mensch, Maus und Ratte und eignet sich daher für Studien zwischen Spezies.
• Bei der Immunfluoreszenz an fixierten/permeabilisierten Zellen (IF‑P) markiert Villin-1 typischerweise Mikrovilli und andere aktinreiche Zellvorsprünge; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Ihren Zelltyp.
• Für die Immunhistochemie an paraffineingebetteten Schnitten (IHC‑P) kann eine Antigenretrieval erforderlich sein; testen Sie Standardprotokolle auf Citrat- oder EDTA-Basis.
• Für ELISA können Sie diesen Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwenden; kombinieren Sie ihn mit einem kompatiblen Detektionsantikörper für Sandwich-Formate.

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