Anti-VHL Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P40337

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: VHL-Funktion und Lokalisierung

• VHL (von-Hippel-Lindau-Tumorsuppressor) ist die Substraterkennungs-Untereinheit des VCB-Cul2-E3-Ubiquitin-Ligase-Komplexes, der Protekte für den proteasomalen Abbau markiert. Verwandte Referenzen: PMID:10944113 PMID:17981124 PMID:19584355

• Unter normoxischen Bedingungen erkennt VHL spezifisch hydroxylierte hypoxie-induzierbare Faktor-Alpha-Untereinheiten (HIF-α), was zu einem ubiquitinabhängigen Abbau und einer Unterdrückung der HIF-vermittelten Transkriptionsprogramme führt. Verwandte Referenzen: PMID:10944113 PMID:17981124

• VHL ubiquitiniert auch und fördert den Abbau alternativer Substrate, einschließlich ADRB2 und dem mTORC1-Gerüstprotein RPTOR, und reguliert so die mTORC1-Signalisierung negativ. Verwandte Referenzen: PMID:19584355 PMID:34290272

• Das Protein lokalisiert sich dynamisch im Zytoplasma, Kern, Zellmembran und endoplasmatischen Retikulum, was seine Beteiligung an mehreren Signalwegen und die räumliche Regulation der Ubiquitinierung ermöglicht.

• VHL wird vorwiegend im adulten und fetalen Gehirn sowie in der Niere exprimiert – Geweben, die bei VHL-Verlust anfällig für Tumorentstehung sind –, was seine gewebsspezifische Rolle als Tumorsuppressor unterstreicht.

• Das VHL-Gen produziert durch alternatives Spleißen und alternative Translationsinitiation mehrere Isoformen (einschließlich pVHL und G7), die unterschiedliche funktionelle Eigenschaften aufweisen können.

• Als etablierter Tumorsuppressor führt die biallelische Inaktivierung von VHL zu einer konstitutiven HIF-Aktivierung und ist das treibende Ereignis bei der von-Hippel-Lindau-Krankheit und dem sporadischen klarzelligen Nierenzellkarzinom.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogenregion (Aminosäuren 1–100 von humanem VHL) deutet darauf hin, dass der Antikörper das N-Terminus erkennt; führen Sie bei Bedarf eine Epitop-Mapping durch.
• Beim Western Blot (WB) ist ein Erwartung eines Hauptbandes in der Nähe von 24 kDa; alternative Isoformen oder posttranslationale Modifikationen können zusätzliche Bänder erzeugen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) und die Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen und Fixierungsprotokolle für das betreffende Gewebe oder den Zelltyp optimiert werden.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-VHL; validieren Sie ihn im relevanten Speziesmodell vor quantitativen Assays.
• Für ELISA-Anwendungen: Verwenden Sie ihn in Kombination mit einem Fangantikörper oder als Nachweisreagenz nach Bestätigung der Kompatibilität mit dem Assay-Format.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz über positive Kontrolllysate oder rekombinante Proteine überprüft werden.

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