Anti-Versican monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P13611

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Versican-Funktion und Lokalisierung

• Versican ist ein großes Chondroitinsulfat-Proteoglykan, das zur Aggrecan/Versican-Familie gehört. Es ist auch als CSPG2, PG-M und gliales Hyaluronat-bindendes Protein (GHAP) bekannt.
• Es spielt eine Schlüsselrolle in der interzellulären Signalübertragung und verbindet Zellen mit der extrazellulären Matrix. Es bindet Hyaluronsäure und trägt so zur Gewebshydratation und strukturellen Integrität bei.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen (V0, V1, V2, V3), die sich in der Anzahl der Chondroitinsulfat-Bindungsdomänen unterscheiden und gewebespezifische Expressionsmuster aufweisen.
• Versican ist in der extrazellulären Matrix lokalisiert und wird sezerniert; es findet sich auch in Zellfortsätzen, einschließlich des äußeren Segments von Photorezeptoren und der interphotorezeptorischen Matrix in der Netzhaut.
• Das Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung und der Bildung von Disulfidbrücken. Es enthält EGF-ähnliche, Immunglobulin-ähnliche und Lektin-Domänen sowie Sushi-Repeats.
• Die Gewebeexpression ist breit, mit Nachweis in Plazenta, Liquor cerebrospinalis, Fibroblasten, Urin, Netzhaut und Gehirn. Die Isoformen V0/V1 werden in verschiedenen neuralen Geweben und Tumoren exprimiert, während V2 auf normales Gehirn und Gliome beschränkt ist.
• Mit Versican assoziierte Schlüsselwörter sind alternatives Spleißen, Kalziumbindung, Katarakt und extrazelluläre Matrix, was auf eine Beteiligung sowohl an normaler Physiologie als auch an Krankheitszuständen hinweist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 3200–3396 innerhalb der C-terminalen Region von humanem Versican; diese Region kann in mehreren Isoformen vorhanden sein. Bestätigen Sie die Spezifität für die gewünschte Isoform mit geeigneten Kontrollen.
• Für die Western-Blot-Analyse sollten aufgrund des hohen vorhergesagten Molekulargewichts (~373 kDa) Polyacrylamidgele mit niedrigem Prozentanteil und verlängerte Transferzeiten in Betracht gezogen werden, um ein effizientes Blotten sicherzustellen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in relevanten Proben systemen, wie z.B. humanen Plazenta- oder Hirnlysaten, von denen bekannt ist, dass sie Versican exprimieren. Aufgrund der Kreuzreaktivität des Antikörpers können auch Mausproben verwendet werden.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Antikörperkonzentration und verwenden Sie einen geeigneten rekombinanten Protein- oder Peptidstandard, um eine verlässliche Standardkurve zu erstellen.
• Dieser Antikörper wurde nicht in anderen Anwendungen getestet; bei Versuchen mit Immunhistochemie oder Immunfluoreszenz ist zu beachten, dass es sich bei Versican um ein sezerniertes Matrixprotein handelt, das möglicherweise Antigen-Demaskierung oder spezielle Fixierungsprotokolle erfordert.

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