Anti-VEGF-Rezeptor 2 Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P35968

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des VEGF-Rezeptors 2

• Der VEGF-Rezeptor 2 (VEGFR2), auch bekannt als KDR, FLK-1 oder CD309, ist ein transmembraner Tyrosinkinase-Rezeptor, der der Hauptmediator der VEGFA-getriebenen Angiogenese und Gefäßpermeabilität ist. Er bindet auch VEGFC und VEGFD und spielt eine wesentliche Rolle bei der Gefäßentwicklung und der embryonalen Hämatopoese.
• Als Schlüsselregulator der Endothelzellbiologie fördert VEGFR2 Proliferation, Überleben, Migration und Differenzierung von Endothelzellen und ist entscheidend für die Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts.
• Die Aktivierung von VEGFR2 löst mehrere nachgeschaltete Signalkaskaden aus, darunter der MAPK/ERK-Weg, der AKT1-Weg und die PLCG1-vermittelte Kalziummobilisierung. Er phosphoryliert außerdem PIK3R1, NOS3, SRC und PTK2/FAK1, wodurch er mit der Produktion von Stickstoffmonoxid und der Dynamik von Fokalkontakten verbunden ist.
• Das menschliche KDR-Gen kodiert für mehrere Isoformen. Isoform 1 ist der vollständige Rezeptor, während Isoformen ohne die Transmembrandomäne (Isoformen 2 und 3) als lösliche Decoy-Rezeptoren wirken und die Lymphangiogenese negativ regulieren, indem sie VEGFA und VEGFC binden.
• VEGFR2 ist überwiegend an der Zellmembran lokalisiert, wird aber auch an Zellverbindungen, im Zytoplasma, Kern, endoplasmatischen Retikulum und frühen Endosomen nachgewiesen und kann sekretiert werden – was seiner dynamischen Verkehrs- und Signalrolle entspricht.
• Es ist weit verbreitet exprimiert und wird auf Proteinebene in der Hornhaut nachgewiesen. Laut UniProt-Schlüsselwörtern wird es stark posttranslational durch Phosphorylierung, Glykosylierung und Ubiquitinierung modifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1150-1250 innerhalb der C-terminalen intrazellulären Domäne umfasst. Diese Region ist entfernt von bekannten Hauptphosphorylierungsstellen und sollte sowohl unter denaturierten (WB) als auch nativen (ELISA) Bedingungen zugänglich sein. Überprüfen Sie jedoch die Epitopverfügbarkeit in Ihrem spezifischen Probensystem.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von humanem VEGFR2 beträgt 151,5 kDa (UniProt) / 152 kDa (Hersteller), wobei potenzielle Glykosylierung zu einer Wanderung bei höheren scheinbaren Massen führen kann. Führen Sie bei WB Gele mit ausreichend hohem Prozentsatz aus und verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker, um den reifen Rezeptor aufzutrennen.
• Dieser Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-VEGFR2, wodurch er für Studien mit mehreren Spezies geeignet ist. Bestätigen Sie nach Möglichkeit die Zielspezifität in Ihrem Modellorganismus durch Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.
• Für ELISA können Sie den Antikörper sowohl als Fang- als auch als Detektionsantikörper in einem Sandwich-Format verwenden, wenn Sie ihn mit einem nicht konkurrierenden monoklonalen oder polyklonalen Antikörper paaren, der gegen ein anderes Epitop gerichtet ist. Standard-Checkerboard-Titrationen sind empfehlenswert.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann es zu geringen Chargenschwankungen kommen. Fügen Sie interne Referenzkontrollen für die Reproduzierbarkeit über Experimente hinzu und validieren Sie jede neue Charge vor der Verwendung in großem Maßstab.

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