Anti-VEGF Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P15692

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von VEGF

• VEGF ist ein zentraler Wachstumsfaktor, der Angiogenese, Vaskulogenese sowie Proliferation, Migration und Überleben von Endothelzellen induziert; er erhöht zudem die vaskuläre Permeabilität (PubMed:34530889). Er bindet an die Rezeptoren FLT1/VEGFR1, KDR/VEGFR2, Heparansulfat, Heparin und NRP1/Neuropilin-1 (höchstwahrscheinlich), sowie an den DEAR/FBXW7-AS1-Rezeptor (PubMed:17446437). Verwandte Referenzen: PMID:34530889 PMID:17446437
• VEGF spielt eine entscheidende Rolle bei der zellulären Antwort auf Hypoxie, indem es HIF1A induziert und Zellen vor dem hypoxiebedingten Zelltod schützt (PubMed:35455969; höchstwahrscheinlich). Verwandte Referenzen: PMID:35455969
• Eine Isoform von VEGF bindet an KDR, aktiviert aber keine nachgeschalteten Signalwege und hemmt dadurch die Angiogenese sowie das Tumorwachstum.
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma und Zellkern und wird in den extrazellulären Raum sezerniert, unter anderem in das Endoplasmatische Retikulum, den Golgi-Apparat und die extrazelluläre Matrix.
• VEGF ist weit verbreitet exprimiert, mit höheren Spiegeln bei Hypophysentumoren im Vergleich zur normalen Hypophyse.
• Das Gen unterliegt alternatives Spleißen und alternativer Promoternutzung, wodurch mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Funktionen entstehen; posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Für das Western Blotting sollten Sie Proben sowohl unter reduzierenden als auch nicht reduzierenden Bedingungen laufen lassen, um monomere (~15-27 kDa) und dimere (~34-45 kDa) VEGF-Formen nachzuweisen; das Produkt kann Banden entsprechend diesen Molekulargewichten erkennen.
• Validieren Sie die Spezifität und Kreuzreaktivität des Antikörpers in der relevanten Spezies (Mensch, Maus, Ratte) und dem Anwendungssystem durch die Verwendung geeigneter Kontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC optimieren Sie die Permeabilisierungsprotokolle, um intrazelluläre VEGF-Pools nachzuweisen.
• Für den ELISA kombinieren Sie diesen Antikörper mit einem geeigneten Capture- oder Detektionsreagenz und bestätigen Sie die Leistung mit rekombinanten VEGF-Standards.

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