Anti-VCP Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P55072

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: VCP-Funktion und -Lokalisierung

• Transitional endoplasmic reticulum ATPase (auch bezeichnet als p97 oder VCP), die als homohexamerer Chaperon und Segregase in verschiedenen zellulären Pathways fungiert.
• Zentral für das Ubiquitin-Proteasom-System: Der UFD1-VCP-NPLOC4-Komplex bindet ubiquitinierte fehlgefaltete Proteine und exportiert sie aus dem ER zum cytosolischen Abbau.
• Kritisch für die Golgi-Dynamik: Notwendig für die mitotische Fragmentierung und die postmitotische Reassemblierung von Golgi-Stacks und erleichtert das Vesikel-Budding am Übergangs-ER.
• Wird in einem RNF8/RNF168-abhängigen Mechanismus an DNA-Doppelstrangbrüche rekrutiert, fördert die Anreicherung von TP53BP1 und trägt zur DNA-Reparatur bei. (PubMed:22020440, PubMed:22120668) Verwandte Referenzen: PMID:22020440 PMID:22120668
• Essenziell für die Autophagie: Erforderlich für die Reifung von ubiquitinhaltigen Autophagosomen und vermittelt die Extraktion von G3BP1 aus Stress Granula, um Aggregate zu beseitigen. (PubMed:20104022, PubMed:27753622, PubMed:38762759, PubMed:29804830, PubMed:34739333) Verwandte Referenzen: PMID:20104022 PMID:27753622 PMID:38762759 PMID:29804830 PMID:34739333
• Reguliert die Produktion von Typ-I-Interferon negativ durch Interaktion mit ubiquitiniertem RIGI, rekrutiert RNF125, um den Abbau von RIGI zu fördern. (PubMed:26471729) Verwandte Referenzen: PMID:26471729
• Subzelluläre Lokalisierung: Im Zytoplasma, Cytosol, endoplasmatischen Retikulum, Zellkern und Stress Granula gefunden, konsistent mit seinen multifunktionalen Rollen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von humanem VCP (P55072) abdeckt. Es wird erwartet, dass diese N-terminale Region einen Antikörper generiert, der vollständiges VCP (~89 kDa) in denaturierenden Western Blots erkennt.
• Für WB: Verwenden Sie Standard-reduzierende Bedingungen; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 89 kDa, aber posttranslationale Modifikationen können leichte Verschiebungen verursachen. Validieren Sie die Beladung mit geeigneten Kontrollen.
• Für IF/ICC: Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten optimiert werden; es wird erwartet, dass der Antikörper VCP an den berichteten Orten (Zytoplasma, ER, Zellkern, Stress Granula) nachweist.
• In ELISA kann dieser Antikörper für den empfindlichen Nachweis von rekombinantem oder nativem VCP verwendet werden; Erwägen Sie die Kombination mit einem Detektionsantikörper für Sandwich-Assays.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-VCP wurde gezeigt, was es für Studien über diese Spezies geeignet macht; führen Sie dennoch eine speziespezifische Validierung in Ihrem Modellsystem durch.
• Wie bei jedem monoklonalen Antikörper ist eine Chargen-zu-Chargen-Konsistenz typisch, aber titrieren und validieren Sie immer in Ihrem spezifischen Anwendungskontext unter Verwendung von positiven und negativen Kontrollen.

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