Anti-β-Catenin-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA – P35222

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von β-Catenin

• Catenin beta-1 (β-Catenin) ist ein multifunktionales Protein, das vom CTNNB1-Gen (CTNNB) kodiert wird. Es erfüllt eine Doppelfunktion bei der Zelladhäsion und der Transkriptionsregulation.
• In Abwesenheit eines Wnt-Liganden wird β-Catenin durch einen Abbaukomplex (AXIN, APC, GSK3B, CSNK1A1) phosphoryliert und anschließend ubiquitiniert, wodurch es für den proteasomalen Abbau markiert wird. Nach einer Wnt-Stimulation akkumuliert es und wird in den Zellkern transportiert, wo es als Koaktivator der Transkriptionsfaktoren TCF/LEF die Expression von Wnt-Zielgenen induziert. Zugehörige Referenzen: PMID:17524503, PMID:18077326, PMID:18086858
• Es ist ein essenzieller Bestandteil des E-Cadherin:Catenin-Adhäsionskomplexes an den Adhärenzkontakten, verbindet Cadherine mit dem Aktin-Zytoskelett und reguliert die Zell-Zell-Adhäsion.
• β-Catenin pendelt zwischen mehreren subzellulären Kompartimenten, darunter Zytoplasma, Zellkern, Adhärenzkontakte, Zellmembran, Zentrosomen, Spindelpole, Synapsen und das Basalkörperchen des Ziliums, was seine vielfältigen biologischen Funktionen widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Ubiquitinierung, Acetylierung und S-Nitrosylierung regulieren seine Stabilität, Lokalisation und Transkriptionsaktivität streng.
• Fördert den epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT) durch Aktivierung der Transkription von β-Catenin/TCF-Zielgenen, ein Prozess, der an der Metastasierung von Krebs beteiligt ist. Zugehörige Referenzen: PMID:29910125
• Ist über den CDK2/PTPN6/CTNNB1/CEACAM1-Signalweg an der Insulininternalisierung beteiligt und verhindert durch Herunterregulierung von DAPK2 die Anoikis in malignen Epithelzellen. Zugehörige Referenzen: PMID:21262353, PMID:18957423
• Stört die Bildung von PML-Kernkörperchen, indem es die RANBP2-vermittelte SUMOylierung von PML hemmt, und trägt möglicherweise zur Onkogenese bei. Zugehörige Referenzen: PMID:22155184
• Wird in Haarfollikeln, im Kolon, in kortikalen Neuronen und in Brustkrebsgewebe exprimiert. Zugehörige Referenzen: PMID:29367600

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 667–781) des humanen β-Catenins. Diese Region ist zwischen den Spezies relativ konserviert, was mit der angegebenen Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus und Ratte übereinstimmt.
• Beim Western Blot (WB) wird eine Bande bei etwa 85 kDa erwartet. Optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnungen empirisch und verwenden Sie geeignete Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie an Paraffinschnitten (IHC-P) können Methoden zur Antigenretrieval und Fixierungsbedingungen die Färbung beeinflussen. Validieren Sie den Antikörper an relevanten Gewebeschnitten und ziehen Sie die Verwendung bekannter Positiv- und Negativkontrollen in Betracht.
• Die polyklonale Beschaffenheit des Antikörpers kann eine robuste Detektion in verschiedenen Anwendungen ermöglichen. Für kritische quantitative Assays sollte jedoch die Chargenkonsistenz bestätigt werden.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) können ein effizienter Pull-down von der Antikörperkonzentration, der Zusammensetzung des Lysepuffers und der Inkubationszeit abhängen. Die direkte Kopplung des Antikörpers an Beads kann eine Interferenz durch die schwere Kette im anschließenden WB reduzieren.
• Verwenden Sie den Antikörper im ELISA als Fang- oder Detektionsreagenz, nachdem die optimale Paarungskonzentration und Spezifität bestimmt wurden.

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