Anti-β-Amyloid monoklonaler Antikörper für IF-P, IHC-P, DB, ELISA - P05067

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Amyloid-beta-Vorläuferprotein (APP/β-Amyloid) Funktion und Lokalisierung

• APP ist ein transmembranes Vorläuferprotein, das Amyloid-beta-Peptide liefert; mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen, wobei APP695 in Neuronen vorherrscht und APP751/APP770 in nicht-neuronalen Geweben.
• Homophile Wechselwirkungen zwischen APP-Molekülen auf benachbarten Zellen fördern die Synaptogenese und tragen zur Synapsenbildung und Plastizität bei. Verwandte Referenzen: PMID:25122912
• APP fungiert als Kinesin-1-Membranrezeptor und vermittelt den anterograden axonalen Transport von Beta-Sekretase und Presenilin 1 zu den Synapsen. Verwandte Referenzen: PMID:17062754, PMID:23011729
• APP und seine abgeleiteten Amyloid-beta-Peptide sind an der Metall-Homöostase beteiligt, binden Kupfer, Zink und Eisen; kupfermetalliertes APP induziert oxidativen Stress und neuronalen Tod, während Amyloid-beta-Peptide die metallkatalysierte Lipoprotein-Oxidation hemmen.
• Das Protein lokalisiert an der Zellmembran, in clathrin-bedeckten Gruben, frühen Endosomen, Golgi-Apparat, endoplasmatischem Retikulum und wird sezerniert; in Neuronen konzentriert es sich in Wachstumskegeln und dem Perikaryon.
• APP wird im Gehirn (besonders im frontalen und perisylvischen Kortex), in der Niere, im Herzen und in der Milz stark exprimiert; seine fehlerhafte Prozessierung führt zur Akkumulation von Amyloid-beta, einem Kennzeichen der Alzheimer-Krankheit.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Angesichts des synthetischen Peptid-Immunogens liegt das Epitop wahrscheinlich innerhalb der Amyloid-beta-Sequenz; ziehen Sie die Verwendung von Amyloid-beta-Peptid-Kompetitionsassays in Betracht, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für IHC-P wird eine Standard-Hitze-induzierte Antigen-Retrieval in Citratpuffer (pH 6.0) empfohlen; optimieren Sie die Inkubationszeiten basierend auf Gewebetyp und Fixierung.
• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit Maus-APP; er könnte für die Färbung in Maus-Alzheimer-Modellen geeignet sein, aber validieren Sie die Leistung in Ihrem spezifischen Modellsystem.
• In ELISA-Anwendungen beschichten Sie Platten mit rekombinantem APP oder synthetischem Peptid und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.
• Für Dot-Blot (DB) wenden Sie Serienverdünnungen von gereinigten Amyloid-beta-Peptiden an, um die Empfindlichkeit und den linearen Bereich zu bewerten.

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