Anti-USP8 Kaninchen-pAk für WB, IF/ICC, ELISA - P40818

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: USP8-Funktion und -Lokalisierung

• USP8, auch bekannt als Ubiquitin-Carboxyl-Terminal-Hydrolase 8, ist eine deubiquitinierendes Enzym, das konjugiertes Ubiquitin von Substratproteinen entfernt und so die Protein-stabilität und den -umsatz reguliert.
• Es hydrolysiert sowohl Lys-48- als auch Lys-63-verknüpfte Polyubiquitinketten, und seine katalytische Aktivität wird während der M-Phase verstärkt, was es mit der Zellzyklusregulierung verbindet (Schlüsselwörter: Zellzyklus, Phosphoprotein).
• USP8 spielt eine entscheidende Rolle bei der endosomalen Sortierung und dem Membranverkehr, indem es die Ubiquitin-Dynamik auf frühen Endosomen steuert. Es deubiquitiniert EPS15 und erhält die Stabilität von ESCRT-0, wodurch die Endosom-Morphologie bewahrt wird.
• In der Wachstumsfaktor-Signalisierung entfernt USP8 Ubiquitin vom epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) und moduliert so den Rezeptorabbau und die Aktivität der nachgeschalteten MAPK-Signalwege.
• USP8 deubiquitiniert BACE1, hemmt dessen lysosomalen Abbau und beeinflusst die Verarbeitung des Amyloid-Vorläuferproteins (APP) sowie die Bildung von Amyloid-Beta. Verwandte Referenzen: PMID:27302062
• Darüber hinaus ist USP8 an der Regulation der T-Zell-Anergie durch Komplexbildung mit RNF128 und OTUB1 beteiligt und trägt zur Akrosom-Biogenese während der Spermatogenese bei.
• Zellulär lokalisiert sich USP8 im Zytoplasma, Zellkern, an der Endosom-Membran und der Zellmembran, was seine vielfältigen funktionellen Rollen widerspiegelt.
• Mutationen in USP8 sind mit dem Cushing-Syndrom und anderen Störungen verbunden, was seine klinische Bedeutung unterstreicht (Schlüsselwörter: Krankheitsvariante, Cushing-Syndrom).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die N-terminale Region (aa 1-270) von humanem USP8 ab, was aufgrund alternativen Spleißens mehrere Isoformen erkennen kann. Überprüfen Sie die Isoform-Spezifität in Ihrem experimentellen System.
• Für den Western Blot ist ein Hauptband bei ca. 128 kDa unter reduzierenden Bedingungen zu erwarten. Validieren Sie das beobachtete Molekulargewicht anhand bekannter Kontrollen und erwägen Sie die Verwendung eines Gels mit niedrigem Prozentsatz für eine optimale Trennung von hochmolekularen Proteinen.
• Bei IF/ICC zeigt USP8 eine dynamische subzelluläre Lokalisierung. Fügen Sie entsprechende Permeabilisierungs- und Blockierungsschritte ein; eine Co-Färbung mit Organellmarkern (z. B. EEA1 für frühe Endosomen) wird empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden, aber die optimalen Konzentrationen müssen für jedes Assay-Format empirisch ermittelt werden.
>Dieser Antikörper zeigt eine bestätigte Kreuzreaktivität mit murinem und rattem USP8. Verwenden Sie bei der Arbeit mit Nagetiermodellen immer artspezifische positive und negative Kontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.

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