Anti-USP30 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q70CQ3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: USP30-Funktion und -Lokalisierung

• USP30 (Ubiquitin-Carboxyl-Terminal-Hydrolase 30) ist eine Deubiquitinierungsenzym, auch bekannt als Deubiquitinierungsenzym 30, Ubiquitin-Thioesterase 30 und Ubiquitin-spezifische Prozessprotease 30, kodiert durch das USP30-Gen.
• An der äußeren Mitochondrienmembran verankert, wirkt USP30 als Schlüsselinhibitor der Mitophagie, indem es die Wirkung von Parkin (PRKN) entgegenwirkt; es hydrolysiert das von Parkin an Zielproteine wie RHOT1/MIRO1 und TOMM20 angehängte Ubiquitin und blockiert damit die Fähigkeit von Parkin, die Mitophagie anzutreiben. Verwandte Referenzen: PMID:18287522 PMID:24896179 PMID:25527291
• Spaltet bevorzugt 'Lys-6'- und 'Lys-11'-verknüpfte Polyubiquitinketten, zwei Arten von Verknüpfungen, die an der mitophagischen Signalgebung beteiligt sind; spaltet nicht effizient Polyubiquitin, das an 'Ser-65' phosphoryliert ist. Verwandte Referenzen: PMID:25621951 PMID:25527291
• Reguliert die mitochondriale Fusion negativ durch Vermittlung der Deubiquitinierung von MFN1 und MFN2.
• Subzellulärer Ort: äußere Mitochondrienmembran; enthält eine Transmembranhelix.
• Gewebsspezifität: exprimiert in Skelettmuskel, Bauchspeicheldrüse, Leber und Niere.
• Gehört zur Peptidase-Familie C19; klassifiziert als Thiolprotease und Hydrolase, die am Ubiquitin-Konjugationsweg beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 57-390 von humanem USP30 und deckt den katalytischen Kern ab; berücksichtigen Sie die Konservierung dieser Region bei der Beurteilung der Reaktivität in Maus und Ratte.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 59 kDa erwartet; validieren Sie die Größe der detektierten Bande in Ihrem spezifischen Probensystem, da posttranslationale Modifikationen die Wanderung verschieben können.
• In der Immunfluoreszenz/ICC ist eine Färbung der äußeren Mitochondrienmembran zu erwarten; eine Gegenfärbung mit einem mitochondrialen Marker wird empfohlen, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen: Optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnungen unter Verwendung eines rekombinanten USP30-Proteinstandards, falls verfügbar.
• Bei der Untersuchung der Mitophagieregulation sollten Sie eine gleichzeitige pharmakologische oder genetische Manipulation von Parkin in Betracht ziehen, um die USP30-Deubiquitinaseaktivität in Ihrem Modell zu bewerten.

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