Anti-USP14 Monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P54578

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von USP14

• Auch bekannt als Deubiquitinierendes Enzym 14, Ubiquitin-Thioesterase 14 oder Ubiquitin-spezifische Prozessierungsprotease 14, USP14 wird vom USP14-Gen kodiert (alternativer Name TGT).
• Es fungiert als proteasomassozierte Deubiquitinase, die Ubiquitin von proteasomgebundenen ubiquitinierten Proteinen freisetzt (PubMed:35145029) und die Regeneration von Ubiquitin am Proteasom sicherstellt (PubMed:18162577, PubMed:28396413).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:35145029 PMID:18162577 PMID:28396413
• USP14 ist für den Abbau des Chemokinrezeptors CXCR4 erforderlich, ein Prozess, der für die CXCL12-induzierte Zellchemotaxis entscheidend ist (PubMed:19106094).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19106094
• Unter nicht belasteten Bedingungen wirkt USP14 als physiologischer Inhibitor der endoplasmatischen Retikulum-assoziierten Degradation (ERAD), indem es den Abbau von ungefalteten ER-Proteinen durch Interaktion mit ERN1 hemmt (PubMed:19135427).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19135427
• Im angeborenen Immunsystem stabilisiert USP14 den viralen DNA-Sensor cGAS, hemmt dadurch dessen autophagische Degradation und trägt zur antiviralen Abwehr bei (PubMed:27666593).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:27666593
• Es reguliert die epigenetischen Markierungen H3K9me2 und H3K9me3 negativ, indem es die OPTN-vermittelte selektive autophagische Degradation der Demethlyase KDM4D hemmt (PubMed:35145029).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:35145029
• USP14 ist essenziell für die synaptische Entwicklung und Funktion an neuromuskulären Verbindungen (NMJ) (nach Ähnlichkeit).
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma und die Zellmembran, was mit seiner proteasomassoziierten und membrannahen Signalling-Funktion übereinstimmt. Darüber hinaus unterliegt USP14 Acetylierung, Phosphorylierung und alternativem Spleißen, die seine Aktivität und Interaktionen regulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 371-473 des menschlichen USP14 und deckt eine C-terminale Region ab. Bei der Verwendung dieses monoklonalen Antikörpers bestätigen Sie, dass das Epitop unter Ihren experimentellen Bedingungen erhalten bleibt (z. B. denaturierend vs. nativ).
• Für das Western Blotting (WB) hat USP14 ein vorausgesagtes Molekulargewicht von 56 kDa. Aufgrund möglicher posttranslationaler Modifikationen (z. B. Phosphorylierung, Acetylierung) können Sie eine leicht verschobene Bande beobachten; validieren Sie dies mit geeigneten Kontrollen.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) werden Vorreinigung (Pre-Clearing) und die Optimierung der Antikörperkonzentration empfohlen, um unspezifische Bindung zu reduzieren – insbesondere aufgrund der monoklonalen Natur des Antikörpers.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-USP14, was ihn für Studien an Nagermodellen geeignet macht. Überprüfen Sie jedoch immer die Leistung in Ihrem spezifischen Gewebe oder Ihrer Zelllinie.
• Für ELISA-Anwendungen berücksichtigen Sie die Direkt- vs. Sandwich-Anordnung und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.

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