Anti-UPF1/RENT1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q92900

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: UPF1/RENT1 Funktion und Lokalisation

• UPF1 (Regulator of nonsense transcripts 1), auch bekannt als RENT1, NORF1, hUpf1, ist eine ATP-abhängige RNA-Helikase, die für den Nonsense-vermittelten mRNA-Abbau (NMD) unerlässlich ist. NMD ist ein Überwachungsmechanismus, der fehlerhafte mRNAs mit vorzeitigen Stoppcodons abbaut und zudem die Expression normaler mRNAs moduliert.

• Das Protein wird bei der Termination an translatierende Ribosomen rekrutiert, wo es den transienten SURF-Komplex (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3) bildet. Beim EJC-abhängigen NMD assoziiert dieser Komplex über UPF2 mit dem Exon-Junction-Komplex und bildet den UPF1-UPF2-UPF3-Überwachungskomplex, der den mRNA-Abbau auslöst.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:19417104
  PMID:21419344

• UPF1 durchläuft einen kritischen Phosphorylierungs-Dephosphorylierungs-Zyklus. Seine Phosphorylierung durch die SMG1-Kinase ist ein Schlüsselschritt beim NMD, und die Dephosphorylierung durch PP2A ermöglicht das Recycling von NMD-Faktoren.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:11544179
  PMID:25220460

• UPF1 kann NMD auch unabhängig von UPF2 und UPF3 aktivieren, was auf alternative NMD-Signalwege hindeutet.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:18447585

• Über das NMD hinaus spielt UPF1 eine Rolle beim replikationsabhängigen Histon-mRNA-Abbau am Ende der S-Phase, eine Funktion, die unabhängig von UPF2 ist.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:16086026
  PMID:18172165

• UPF1 besitzt eine ATP-abhängige 5'-3'-Helikase-Aktivität auf RNA:DNA-, RNA:RNA- und DNA:DNA-Substraten. Es weist zudem eine ssDNA-stimulierte ATPase-Aktivität auf und bindet RNA; die Zugabe von ATP verringert die RNA-Bindung.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:10999600
  PMID:18066079
  PMID:26138914

• Subzellulär ist UPF1 primär zytoplasmatisch, lokalisiert aber auch in P-Bodies, der perinukleären Region und im Zellkern.

• Zu den mit UPF1 assoziierten Schlüsselbegriffen gehören Helikase, ATP-Bindung, Zinkfinger, Phosphoprotein, Nonsense-vermittelter mRNA-Abbau und Wirt-Virus-Interaktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1-100) des humanen UPF1; dieser Antikörper erkennt möglicherweise das Volllängen-UPF1 sowie alle Isoformen, die diese N-terminale Sequenz teilen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 124 kDa; für Western Blots sollte ein geeigneter Gel-Prozentsatz (z. B. 8 % SDS-PAGE) und eine ausreichende Transferzeit für Proteine mit hohem Molekulargewicht in Betracht gezogen werden.
• Dieser monoklonale Kaninchen-Antikörper bietet eine hohe Spezifität und einen niedrigen Hintergrund; er wurde für WB, IF/ICC, IP und ELISA validiert. Für jede Anwendung sollte der Antikörper titriert und im jeweiligen Probensystem validiert werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist dokumentiert, was ihn für Studien in diesen Modellorganismen geeignet macht; die endogenen Expressionsniveaus können jedoch je nach Gewebe und Zelllinie variieren.
• Für IF/ICC sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte durchgeführt und der Antikörper in einer für Ihren spezifischen zellulären Kontext optimierten Verdünnung verwendet werden.

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