Anti-UMPS Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P11172

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: UMPS-Funktion und -Lokalisierung

• UMPS (Uridin-5'-monophosphat-Synthase) ist ein bifunktionelles Enzym, das die letzten beiden Schritte der de novo-Pyrimidin-Biosynthese katalysiert: Oroat-Phosphoribosyltransferase (OPRT) wandelt Oroat in OMP um, und Orotidin-5'-phosphat-Decarboxylase (ODC) wandelt anschließend OMP in UMP um.
• Das Protein ist auch als OPRT und ODCase bekannt, was seine dualen enzymatischen Aktivitäten widerspiegelt.
• Als ein kritisches Enzym im Pyrimidin-Stoffwechsel stellt UMPS die Versorgung mit UMP für die RNA- und DNA-Synthese sowie für andere zelluläre Prozesse sicher.
• Das UMPS-Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch mehrere Transkriptvarianten entstehen, die die Enzymfunktion oder -regulation beeinflussen können.
• Mutationen im UMPS-Gen sind mit hereditärer Orotazidurie verbunden, einer seltenen Stoffwechselstörung, die durch megaloblastische Anämie und Orotsäure-Kristallurie gekennzeichnet ist (Schlüsselwort: Krankheitsvariante).
• Posttranslationale Modifikationen von UMPS umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität oder Stabilität regulieren können (Schlüsselwörter: Acetylierung, Phosphoprotein).
• Die dreidimensionale Struktur von UMPS wurde bestimmt und zeigt die räumliche Organisation seiner OPRT- und ODC-Domänen (Schlüsselwort: 3D-Struktur).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 181-480) umfasst einen Bereich, der funktionelle Domänen enthält; daher kann der Antikörper mehrere Spleißvarianten, die diese Sequenz enthalten, erkennen.
• Für Western Blots sollten Sie Ganzzell-Lysate von menschlichen Zelllinien, die bekanntermaßen UMPS exprimieren (z. B. HeLa oder HEK293), verwenden und geeignete Ladungskontrollen einbeziehen.
• Bestimmen Sie im ELISA durch Schachbrett-Titration das optimale Beschichtungsantigen und die Antikörperkonzentration und bestätigen Sie die Spezifität mithilfe von positiven und negativen Kontrollantigenen.
• Da der Antikörper für Reaktivität mit menschlichen Proben validiert ist, kann eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies nicht angenommen werden und sollte einzeln getestet werden.

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