Anti-ULK1/ULK2 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O75385 / Q8IYT8

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ULK1-Funktion und Lokalisation

• ULK1 ist eine Serin/Threonin-Kinase, die für die Autophagie-Initiation essentiell ist. Sie wirkt stromaufwärts des PI3K-Komplexes, um die Bildung von Autophagophoren als Reaktion auf Nährstoffmangel zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:18936157, PMID:21460634, PMID:21795849
• Sie ist an Rückkopplungsschleifen mit mTORC1 und AMPK beteiligt, reguliert diese energieempfindlichen Signalwege und wird von ihnen reguliert, um die Autophagie fein abzustimmen. Verwandte Referenzen: PMID:21795849, PMID:21460634
• ULK1 phosphoryliert mehrere nachgeschaltete Ziele, darunter AMBRA1, ATG4B, FLCN, SESN2 und SQSTM1, um die Nukleation, Elongation und Cargo-Erkennung von Autophagosomen zu koordinieren. Verwandte Referenzen: PMID:20921139, PMID:28821708, PMID:25126726, PMID:25040165, PMID:37306101
• Über die Autophagie hinaus spielt ULK1 eine Rolle bei der frühen neuronalen Differenzierung und wird für die Axonbildung von Körnerzellen benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:11146101
• ULK1 befindet sich hauptsächlich im Zytoplasma und Zytosol und translokiert bei Autophagie-Induktion zu präautophagosomalen Strukturen.
• Es ist in adulten Geweben allgegenwärtig exprimiert, mit nachweisbaren Spiegeln in Skelettmuskel, Herz, Bauchspeicheldrüse, Gehirn, Plazenta, Leber, Niere und Lunge.
• Der Antikörper zielt auf eine konservierte N-terminale Region (aa 1–283) ab und erkennt sowohl ULK1 als auch sein Homolog ULK2 (Q8IYT8), was eine umfassende Detektion von ULK-Familien-Kinasen ermöglicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Kinasedomäne (aa 1–283), die für die katalytische Aktivität entscheidend ist. Dieses Design kann die Detektion von sowohl gesamtem als auch phosphoryliertem ULK1/ULK2 ermöglichen, jedoch sollte die Phosphorylierungsstatus-Spezifität experimentell validiert werden.
• Für Western Blot sollten Ganzzelllysate von humanen Zelllinien unter Autophagie-stimulierenden Bedingungen (z.B. Aminosäureentzug oder Rapamycin-Behandlung) verwendet werden, um Veränderungen in der Proteinexpression oder Mobilitätsverschiebung zu beobachten.
• ELISA-Protokolle erfordern möglicherweise eine Optimierung der Beschichtungsantigen-Konzentration, der Blockierungspuffer und der Antikörperverdünnung, um optimale Signal-Rausch-Verhältnisse zu erreichen.
• Da Kreuzreaktivität nur für human gemeldet ist, validieren Sie den Antikörper in der entsprechenden Probenmatrix, wenn Sie humane Proben in Ihrem Assaysystem verwenden.

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