Anti-ULK1 (phospho S555) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – O75385

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ULK1

• Die Serin/Threonin-Proteinkinase ULK1 (Unc-51-ähnliche Kinase 1, ATG1) ist ein wichtiger Initiator der Autophagie, insbesondere als Reaktion auf Nahrungsmangel. Verwandte Referenzen: PMID:18936157, PMID:21460634, PMID:21795849
• Wirkt stromaufwärts des PI3K-Komplexes bei der Regulation der Autophagophorenbildung, einem entscheidenden Schritt bei der Biogenese von Autophagosomen. Verwandte Referenzen: PMID:18936157, PMID:21460634, PMID:21795849
• Funktioniert innerhalb regulatorischer Rückkopplungsschleifen: Es ist ein nachgeschalteter Effektor von mTORC1 und reguliert die mTORC1-Aktivität zudem negativ über die Interaktion mit RPTOR. Verwandte Referenzen: PMID:21795849
• Wird durch AMPK-vermittelte Phosphorylierung aktiviert und phosphoryliert seinerseits AMPK-Untereinheiten, um die AMPK-Signalgebung zu modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:21460634
• Lokalisiert sich im Zytosol und an präautophagosomalen Strukturen, was mit seiner Rolle bei der frühen Autophagosomenbildung übereinstimmt.
• Wird ubiquitär in adulten Geweben exprimiert, darunter Skelettmuskel, Herz, Bauchspeicheldrüse, Gehirn, Plazenta, Leber, Niere und Lunge.
• Beteiligt an der neuronalen Differenzierung und Axonbildung, was auf Funktionen jenseits der kanonischen Autophagie hinweist. Verwandte Referenzen: PMID:11146101
• Unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen: Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Interaktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein phosphoryliertes Peptid erhoben, daher erkennt er spezifisch ULK1, das an Ser555 phosphoryliert ist. Verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für Western Blot validieren Sie die Spezifität durch den Vergleich von unbehandelten und mit Phosphatase behandelten Proben oder durch Verwendung einer Nicht-Phospho-Peptid-Konkurrenz.
• Bei IF/ICC können Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen erforderlich sein, die Phospho-Epitope erhalten; testen Sie gegebenenfalls eine Methanolfixierung.
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass das beschichtete Antigen das phosphorylierte Epitop präsentiert; verwenden Sie eine unphosphorylierte Kontrolle, um die Spezifität zu bestätigen.
• Kreuzreagiert mit Mensch und Maus; validieren Sie die Reaktivität in Ihrer Zielspezies.

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