Anti-ULBP1 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9BZM6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ULBP1-Funktion und -Lokalisierung

• ULBP1 (UL16-bindendes Protein 1), auch bekannt als ALCAN-beta, NKG2D-Ligand 1 (N2DL-1/NKG2DL1) und Retinsäure-früh Transkript 1I, ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein aus der RAET1-Familie. Es weist strukturelle Ähnlichkeit mit MHC-Klasse-I-Molekülen auf, präsentiert aber keine Peptide.
• Die Hauptfunktion von ULBP1 besteht darin, den KLRK1/NKG2D-Rezeptor auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) zu binden und zu aktivieren, wodurch die NK-Zell-vermittelte Zytotoxizität und Zytokinfreisetzung ausgelöst wird, was für die Immunüberwachung gegen infizierte oder transformierte Zellen entscheidend ist.
• ULBP1 ist ein GPI-verankertes Membranprotein, das hauptsächlich in der Zellmembran lokalisiert ist, aber auch im endoplasmatischen Retikulum nachgewiesen wird, was seine Verarbeitung und Regulation im sekretorischen Weg widerspiegelt.
• ULBP1 wird in einer Vielzahl von Geweben exprimiert, darunter Immunzellen (T-Zellen, B-Zellen), Erythroleukämie-Zelllinien und Organe wie Herz, Gehirn, Lunge, Leber, Hoden, Lymphknoten, Thymus, Mandeln und Knochenmark sowie in fetalen Geweben (Herz, Gehirn, Lunge, Leber), was sowohl auf immunologische als auch auf nicht-immunologische Rollen hindeutet.
• Als stressinduzierter Ligand wird ULBP1 als Reaktion auf DNA-Schäden, Virusinfektionen und zelluläre Transformation hochreguliert und dient als "Gefahrensignal" zur Beseitigung geschädigter Zellen. Seine Expression kann von Viren (z. B. Zytomegalievirus) genutzt werden, um der Immunerkennung zu entgehen.
• Wichtige posttranslationale Merkmale sind ein Signalpeptid für die Sekretion, eine GPI-Anker für die Membranverankerung, N-gebundene Glykosylierung und eine oder mehrere Disulfidbindungen, die seine extrazelluläre Domäne für die NKG2D-Interaktion stabilisieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem rekombinanten Fusionsprotein, das der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) von humanem ULBP1 (NP_079494.1) entspricht. Dieses Fragment deckt das Signalpeptid und einen Teil der extrazellulären Domäne ab und könnte für den Nachweis sowohl des endogenen Voll-Längen- als auch des rekombinanten ULBP1 geeignet sein.
• Für Western-Blot-Anwendungen (WB) sollten Sie Ganzzelllysate von ULBP1-exprimierenden Zelllinien wie K562 (Erythroleukämie) oder Jurkat (T-Zell-Leukämie) verwenden. Angesichts des vorhergesagten Molekulargewichts von ~28 kDa (Kernprotein; Glykosylierung kann die scheinbare Masse erhöhen), optimieren Sie die reduzierenden Bedingungen und die Proteinbeladung.
• Der Antikörper kreuzreagiert auch mit Maus-ULBP1, was ihn zu einem potenziellen Werkzeug für artenübergreifende Studien macht. Validieren Sie jedoch die Reaktivität in den relevanten Mausgewebe- oder Zellmodellen, da die Epitoperhaltung die Leistung beeinflussen kann.
• Für ELISA sollten Sie in Betracht ziehen, diesen monoklonalen Antikörper mit einem polyklonalen Detektionsantikörper zu kombinieren, um einen Sandwich-Assay für lösliches ULBP1 zu etablieren, das von der Zelloberfläche abgespalten werden kann. Optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsschritte für eine hohe Empfindlichkeit.

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