Anti-UCHL5 Poliklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q9Y5K5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von UCHL5

• UCHL5, auch bekannt als Ubiquitin-Carboxyl-Terminal-Hydrolase-Isozym L5, Ubiquitin-C-terminale Hydrolase UCH37 oder Ubiquitin-Thioesterase L5, ist eine Deubiquitinierungsenzym, das beim Menschen durch das UCHL5-Gen kodiert wird.
• Es wirkt als Protease, die spezifisch 'Lys-48'-verknüpfte Polyubiquitinketten spaltet und spielt eine Schlüsselrolle im Ubiquitin-Proteasom-System.
• UCHL5 ist mit der 19S regulatorischen Untereinheit des 26S-Proteasoms assoziiert, wo es zur Substrat-Deubiquitinierung vor dem Abbau beiträgt.
• Es fungiert als vermutete regulatorische Komponente des INO80-Chromatin-Remodellierungskomplexes; es bleibt jedoch innerhalb von INO80 inaktiv und wird nur bei transienter Interaktion mit dem Proteasom über ADRM1 aktiviert.
• Die subzelluläre Lokalisation ist sowohl zytoplasmatisch als auch nukleär, was mit Rollen beim proteasomalen Abbau und chromatinassoziierten Prozessen übereinstimmt.
• Das Protein unterliegt Acetylierung und alternativem Spleißen und wird mit DNA-Schadensantwort, DNA-Reparatur, Rekombination, Transkriptionsregulation und dem Ubiquitin-Konjugationsweg in Verbindung gebracht, wie dies auch aus seinen Schlüsselwortannotationen hervorgeht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses polyklonalen Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 1-328 des menschlichen UCHL5 (NP_001186190.1) und deckt den Großteil der kanonischen Isoform (329 Reste) ab. Aufgrund der volllängigen Natur des Immunogens kann der Antikörper mehrere UCHL5-Isoformen oder Spleißvarianten erkennen; eine Validierung im relevanten experimentellen System wird empfohlen.
• Für Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht von UCHL5 ungefähr 38 kDa. Stellen Sie eine korrekte Probenvorbereitung und Beladungskontrollen sicher; erwägen Sie die Verwendung von Proteaseinhibitor-Cocktails, um einen Abbau des Zielproteins zu verhindern.
• Bei der Immunhistochemie (paraffin-eingebettete Gewebe, IHC-P) sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen optimiert werden, da die Epitope durch Formalinfixierung maskiert werden können. Eine Titrierung der Primärantikörperkonzentration wird empfohlen, um eine spezifische Färbung zu erreichen.
• Wählen Sie für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden, die für den nukleären und zytoplasmatischen Nachweis geeignet sind. Verwenden Sie geeignete Sekundärantikörper mit minimaler Kreuzreaktivität gegenüber der Wirtsspezies.
• Bei ELISA-Anwendungen kann eine Optimierung des Beschichtungsantigens und des Nachweissystems erforderlich sein. Erwägen Sie die Paarung dieses polyklonalen Nachweisantikörpers mit einem monoklonalen Capture-Antikörper für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA.
• Für den Antikörper wurde eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte nachgewiesen; bei der Arbeit mit anderen Spezies überprüfen Sie die Sequenzhomologie und führen Sie einen Pilotversuch durch.

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