Anti-UBL4A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P11441

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: UBL4A-Funktion und Lokalisierung

• Ubiquitin-ähnliches Protein 4A (UBL4A), auch bekannt als GDX, GET5, MDY2, TMA24 und DX254E, ist eine Komponente des BAG6/BAT3-Proteinqualitätskontrollkomplexes.
• Als Teil des BAG6/BAT3-Komplexes hält UBL4A fehlgefaltete und hydrophobe Bereiche enthaltende Proteine in einem löslichen Zustand und erleichtert deren Transport zum endoplasmatischen Retikulum oder Proteasom (PubMed:20676083, PubMed:21636303, PubMed:21743475). Verwandte Referenzen: PMID:20676083 PMID:21636303 PMID:21743475
• Der Komplex vermittelt den posttranslationalen Transport von Tail-anchored/Type II Transmembranproteinen zur ER-Membran, indem er mit der neu entstehenden Transmembrandomäne am Ribosom interagiert (PubMed:20676083, PubMed:25535373, PubMed:28104892). Verwandte Referenzen: PMID:20676083 PMID:25535373 PMID:28104892
• UBL4A ist an der Sortierung fehllokalisierter Proteine des sekretorischen Weges beteiligt, indem es sie entweder zum Proteasom zum Abbau leitet oder zum ER zurückführt (PubMed:21743475). Verwandte Referenzen: PMID:21743475
• Es trägt zur ER-assoziierten Degradation (ERAD) bei, indem es rücktranslozierte ER-Proteine in einem entfalteten, löslichen Zustand für den Transport zum Proteasom hält (PubMed:21636303). Verwandte Referenzen: PMID:21636303
• UBL4A ist im Zytoplasma, Zytosol und Zellkern lokalisiert.
• Es wird als Phosphoprotein annotiert und kann einer Ubiquitin-ähnlichen Konjugation unterzogen werden; es ist auch mit einer Isopeptidbindung assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt das Voll-Längen-Protein (aa 1-157) ab und ermöglicht den Nachweis sowohl von endogenem UBL4A als auch von überexprimierten Konstrukten.
• Für Western Blot wird eine Bande nahe 18 kDa erwartet; die Spezifität sollte mit Human-, Maus- oder Rattenganzzelllysaten validiert und Ladekontrollen berücksichtigt werden.
• Polyklonale Antikörper erfordern möglicherweise eine Titration, um unspezifischen Hintergrund zu minimieren; eine Optimierung der Blockierung und der Primärantikörperverdünnung wird empfohlen.
• Bei der Immunpräzipitation ist zu beachten, dass UBL4A Teil eines dynamischen Komplexes (BAG6/BAT3) ist; die Lyse-/Waschbedingungen sollten entsprechend angepasst werden, um native Wechselwirkungen zu erhalten oder bei Bedarf zu denaturieren.
• ELISA-Protokolle sollten für das Beschichtungsantigen und die Antikörperkonzentration optimiert werden, da der Antikörper gegen rekombinantes Protein erzeugt, aber nicht für spezifische Sandwich-Paare vorvalidiert wurde.

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