Anti-Ubiquitin Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P0CG47

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Ubiquitin (Polyubiquitin-B)

• Ubiquitin, das vom UBB-Gen kodiert wird, ist ein hochkonservatives 76-Aminosäuren-Protein, das entweder frei (ungeankert) oder kovalent über eine Isopeptidbindung an Zielproteine gebunden existiert. Es kann Polyubiquitin-Ketten bilden, die über verschiedene Lysinreste verknüpft sind, oder lineare Ketten über die initiatorische Methionin.
• Polyubiquitin-Ketten erfüllen vielfältige Funktionen: Lys48-verknüpfte Ketten zielen auf Proteine für den proteasomalen Abbau ab; Lys63-verknüpfte Ketten sind an Endozytose, DNA-Reparatur und NF-kappa-B-Signalisierung beteiligt; andere Verknüpfungen (Lys6, Lys11, Lys29, Lys33) regulieren Prozesse wie DNA-Reparatur, ERAD, Zellzyklus, Reaktion auf proteotoxischen Stress und Kinase-Modifikation.
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, im Zellkern und in der äußeren Mitochondrienmembran, was seine weitreichenden Rollen in der zellulären Homöostase und Signalübertragung widerspiegelt.
• Ubiquitin unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und ADP-Ribosylierung, und bildet häufig Isopeptidbindungen während der Konjugation.
• Als Mitglied der Ubiquitin-Proteinfamilie stellt UBB ein Polyubiquitin-Vorläuferprotein dar, das in reife Ubiquitin-Monomere verarbeitet wird, um eine stetige Versorgung für den zellulären Bedarf sicherzustellen.
• Die Ubiquitin-Konjugierung zielt im Allgemeinen auf Lysinreste auf Substraten ab, obwohl eine seltene Konjugierung mit Cystein- oder Serinresten beobachtet wurde, was den Umfang der Ubiquitin-Signalisierung erweitert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1-100 von humanem Ubiquitin, was das全长 reife Protein abdeckt, sodass der Antikörper möglicherweise Gesamt-Ubiquitin erkennt. Erwägen Sie die Verwendung geeigneter Kontrollen, um ungeankertes Ubiquitin von konjugierten Formen in Ihren Assays zu unterscheiden.
• Für Western Blotting (WB) kann eine Bande um 26 kDa dem Polyubiquitin-B-Vorläufer entsprechen, aber einzelne Ubiquitin-Monomere (~8,5 kDa), die an Ziele konjugiert sind, erscheinen als Schmierer mit höherem Molekulargewicht. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und Detektionsbedingungen, um polyubiquitinierte Spezies aufzulösen.
• Bei IHC-P und IF/ICC überprüfen Sie die Spezifität durch Vergleich der Färbemuster in bekannten positiven und negativen Geweben/Zelllinien und fügen Sie gegebenenfalls einen Blockierungspeptid-Wettbewerbsassay hinzu.
• Für ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass das rekombinante Immunogen oder gereinigtes Ubiquitin als Standard verwendet wird, um die Empfindlichkeit und Linearität in Ihrem Assay-System zu validieren.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet den Ubiquitin Kaninchen mAb als zuverlässiges Werkzeug zur Untersuchung der ubiquitinvermittelten Proteolyse, DNA-Reparatur und zellulären Signalwege an. Als Ihr One-Stop-Partner für die Beschaffung von IVD-Rohmaterialien stellen wir validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale Antikörper, Massen-Hilfsreagenzien und die Beschaffung von seltenen Zielrohstoffen bereit, um Ihre diagnostischen und Forschungsprogramme vom Konzept bis zur Klinik zu unterstützen.