Anti-Ube2N/Ubc13 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P61088

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Ube2N/Ubc13-Funktion und Lokalisation

• Ube2N (auch bekannt als Ubc13, UbcH13) ist ein Ubiquitin-konjugierendes Enzym E2, das mit UBE2V1 oder UBE2V2 ein Heterodimer bildet, um die Synthese von nicht-kanonischen 'Lys-63'-verknüpften Polyubiquitinketten zu katalysieren. Diese Art der Polyubiquitinierung zielt nicht auf Proteine für den proteasomalen Abbau ab, sondern erfüllt regulatorische Rollen bei der Signalübertragung, DNA-Reparatur und Zellzykluskontrolle.
• Das Enzym spielt eine entscheidende Rolle im fehlerfreien DNA-Schadens-Toleranzweg, indem es in Verbindung mit den E3-Ligasen HLTF und SHPRH die 'Lys-63'-verknüpfte Polyubiquitinierung von PCNA vermittelt, was für die DNA-Reparatur und das Zellüberleben nach genotoxischem Stress essentiell ist.
• Ube2N ist an der angeborenen Immunsignalübertragung beteiligt: Zusammen mit RNF135 und UBE2V1 katalysiert es die virale RNA-abhängige 'Lys-63'-verknüpfte Polyubiquitinierung von RIG-I, um die Interferon-beta-Produktion zu aktivieren (PubMed:28469175). Darüber hinaus fördert das UBE2V1-UBE2N-Heterodimer die TRIM5-Kapsid-spezifische Restriktionsaktivität, indem es Polyubiquitinketten erzeugt, die den TAK1-Kinasekomplex aktivieren, was zur Expression von NF-kB- und MAPK-responsiven Entzündungsgenen führt (PubMed:31006531). Verwandte Referenzen: PMID:28469175 PMID:31006531
• Subzellulär lokalisiert Ube2N sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, was mit seinen vielfältigen Funktionen in der DNA-Reparatur (nukleär) und zytoplasmatischen Signalwegen übereinstimmt.
• Das Protein ist posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Disulfidbindungsbildung unterworfen und funktioniert über Isopeptidbindungsbildung während des Ubiquitintransfers. Es gehört zur Familie der E2-Ubiquitin-konjugierenden Enzyme und wird unter dem Ubl-Konjugationsweg klassifiziert.
• Ube2N ist an der transkriptionellen Aktivierung von Zielgenen beteiligt und spielt eine Rolle im Zellzyklusfortschritt und der Differenzierung. Es beteiligt sich auch am IL-17A-Signalweg, indem es zusammen mit TRAF3IP2 die 'Lys-63'-verknüpfte Polyubiquitinierung von TRAF6 vermittelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Generierung dieses kaninchenpolyklonalen Antikörpers verwendete Immunogen umfasst das vollständige humane Ube2N-Protein (aa 1–152). Dieses Design kann die Erkennung mehrerer Epitope ermöglichen und möglicherweise eine robuste Detektion bieten, selbst wenn einige Epitope maskiert oder denaturiert sind. Kreuzreaktivität mit anderen E2-Enzymen, die konservierte Regionen teilen, sollte jedoch berücksichtigt werden; eine Validierung im relevanten Probensystem wird empfohlen.
• Der Antikörper ist vom Anbieter für Western Blotting (WB) und ELISA validiert. Für WB ist eine Bande nahe 17 kDa zu erwarten. Es ist ratsam, die Spezifität unter Verwendung von Positiv- und Negativkontrolllysaten zu bestätigen, insbesondere von humanen, murinen oder ratten Zellen, angesichts der berichteten Kreuzreaktivität.
• Angesichts der Rolle von Ube2N in verschiedenen Signalwegen können Forscher seine dynamische Expression oder Modifikation unter Bedingungen von DNA-Schäden, angeborener Immunstimulation oder Zellzyklusarretierung untersuchen. Die endogene Detektionsstärke kann variieren; eine Optimierung der Antikörperverdünnung und Belichtungszeiten kann erforderlich sein.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Kombination mit einem geeigneten Capture-Antikörper oder Antigen helfen, quantitative Assays zu etablieren. Erwägen Sie, Linearität und Sensitivität unter Verwendung von rekombinantem Ube2N-Protein als Standard zu bewerten.

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