Anti-Ube2N/Ubc13 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61088

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Ube2N/Ubc13 Funktion und Lokalisierung

• Ube2N (auch bekannt als Ubc13) ist ein E2-Ubiquitin-konjugierendes Enzym, das funktionelle Heterodimere mit den nicht-katalytischen Untereinheiten UBE2V1 oder UBE2V2 bildet.
• Die UBE2V1–UBE2N- und UBE2V2–UBE2N-Komplexe katalysieren spezifisch die Assembly von nicht-kanonischen Lys-63-verknüpften Polyubiquitinketten, die keine Substrate für den proteasomalen Abbau markieren.
• Spielt eine wesentliche Rolle bei der fehlerfreien DNA-Schadenstoleranz durch Vermittlung der Lys-63-verknüpften Polyubiquitinierung von PCNA, in Zusammenarbeit mit den E3-Ligasen HLTF und SHPRH.
• In der antiviralen angeborenen Immunität katalysiert der UBE2N-UBE2V1-Heterodimer zusammen mit der E3-Ligase RNF135 die virale RNA-abhängige Lys-63-verknüpfte Polyubiquitinierung von RIG-I, ein kritischer Schritt für die nachgelagerte Interferon-Beta-Produktion. Verwandte Referenzen: PMID:28469175, PMID:31006531
• Das Enzym funktioniert auch in NF-κB- und MAPK-Entzündungssignalwegen; beispielsweise wirkt das UBE2V1-UBE2N-Dimer gemeinsam mit TRIM5, um Lys-63-verknüpfte Ketten zu erzeugen, die das TAK1-Kinasekomplex aktivieren, während es zusammen mit TRAF3IP2 die TRAF6-Polyubiquitinierung nachgelagert von IL-17A vermittelt.
• Ube2N lokalisiert sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, was seinen dualen Rollen in der nukleären DNA-Reparatur und der zytoplasmatischen Signalübertragung entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Disulfidbrückenbildung; das reife Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von ~17 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein Peptid innerhalb der ersten 100 Aminosäuren von menschlichem Ube2N erhoben; die Immunogensequenz ist in Maus und Ratte hoch konserviert, was die berichtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blotting wird ein Band bei ca. 17 kDa erwartet; Ganzzelllysate aus menschlichen, murinen oder rattigen Zelllinien sind geeignete Proben.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval erforderlich sein; validieren Sie die Färbung in Geweben, von denen bekannt ist, dass sie Ube2N exprimieren, und verwenden Sie geeignete Kontrollen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) bestätigen Sie die nukleäre und zytoplasmatische Lokalisierung; eine Optimierung der Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen wird empfohlen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper mit einem geeigneten Nachweissystem gepaart werden; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem Ube2N-Protein oder dem Immunisierungspeptid als Positivkontrolle.

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