Anti-UBE2D3-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB und ELISA - P61077

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von UBE2D3

• Proteinidentität und Molekulargewicht: UBE2D3 (UBCH5C, UBC4/5, E2(17)KB3) ist ein Mitglied der E2-Familie der Ubiquitin-konjugierenden Enzyme und wird vom UBE2D3-Gen kodiert. Sein vorhergesagtes Molekulargewicht beträgt etwa 16,7 kDa.
• Zentrale katalytische Funktion: Nimmt Ubiquitin vom E1-Enzym auf und katalysiert dessen kovalente Bindung an Substratproteine. Dadurch wird in vitro sowohl eine über „Lys-11“ als auch eine über „Lys-48“ verknüpfte Polyubiquitinierung vermittelt. Zugehörige Referenzen: PMID:15247280 PMID:15496420 PMID:18284575
• NF-kappa-B-Signalweg: Kooperiert mit dem E2-Enzym CDC34 und dem SCF(FBXW11)-E3-Ligasekomplex, um NFKBIA zu polyubiquitinieren, was zu dessen proteasomalem Abbau führt. UBE2D3 versieht NFKBIA zunächst mit Monoubiquitin an „Lys-21“/„Lys-22“, gefolgt von einer Kettenverlängerung durch CDC34. Zugehörige Referenzen: PMID:20347421 PMID:10329681
• Toleranz gegenüber DNA-Schäden: Wirkt zusammen mit RNF8 als initiierendes E2-Enzym bei der Monoubiquitinierung von PCNA, einem wichtigen Schritt im während der S-Phase aktivierten DNA-Schadentoleranzweg. Zugehörige Referenzen: PMID:18948756
• DNA-Reparatur: Assoziiert mit dem BRCA1/BARD1-E3-Ligasekomplex, um Substrate an durch ionisierende Strahlung induzierten DNA-Schadensstellen zu ubiquitinieren. Zugehörige Referenzen: PMID:16628214
• Regulierung von Rezeptor-Tyrosinkinasen und subzelluläre Lokalisierung: Zielt gemeinsam mit der CBL-E3-Ligase auf EGFR zur Polyubiquitinierung an der Plasmamembran und während des endosomalen Transports. UBE2D3 befindet sich an der Zellmembran und der Endosomenmembran. Zugehörige Referenzen: PMID:18508924
• Proteinhomöostase und weitere Substrate: Ubiquitiniert zusammen mit STUB1 fehlgefaltete Proteine für deren proteasomalen Abbau. Vermittelt außerdem gemeinsam mit MDM2 und TOPORS die Ubiquitinierung von p53/TP53 sowie die Ubiquitinierung von DAPK3, wodurch PML-Kernkörper beeinflusst werden. Zugehörige Referenzen: PMID:11743028 PMID:12646252 PMID:15280377 PMID:18515077
• Immunsignalisierung und Überwachung der Translation: Katalysiert zusammen mit RNF135 die virus-RNA-abhängige, über „Lys-63“ verknüpfte Polyubiquitinierung von RIGI zur Produktion von Interferon beta. Zusammen mit ZNF598 ubiquitiniert es außerdem 40S-ribosomale Proteine nach Ribosomenkollisionen und kooperiert mit GATOR2 bei der Ubiquitinierung von NPRL2. Zugehörige Referenzen: PMID:28469175 PMID:28685749 PMID:36528027

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 des humanen UBE2D3 (NP_003331.1) umfasst. Diese N-terminale Region kann eine hohe Spezifität gewährleisten. Bei der Planung speziesübergreifender Experimente sollte ein Sequenzabgleich mit den Orthologen von Maus und Ratte in Betracht gezogen werden.
• Für Western Blots weist UBE2D3 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 17 kDa auf. Verwenden Sie einen geeigneten Gelanteil, beispielsweise 12-15 % SDS-PAGE, und bestätigen Sie die Bande mit einem bekannten positiven Kontrolllysat aus humanen, murinen oder Rattenzellen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum indirekten Nachweis des Peptidantigens oder von endogenem UBE2D3 verwendet werden. Validieren Sie die Assaybedingungen mit rekombinantem Protein oder Zelllysaten.
• Beachten Sie, dass alternative Spleißprodukte existieren. Bestätigen Sie, dass der Antikörper in Ihrem experimentellen System die gewünschte Isoform erkennt.
• Da UBE2D3 an zahlreichen zellulären Prozessen beteiligt ist, sollten Sie für funktionelle Untersuchungen die Induktion relevanter Stressbedingungen, beispielsweise DNA-Schäden oder proteotoxischen Stress, in Betracht ziehen, um seine Expression oder Aktivität zu modulieren.

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