Anti-UBE2A Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P49459

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: UBE2A-Funktion und -Lokalisierung

• UBE2A fungiert als eine E2-Ubiquitin-konjugierende Enzym, nimmt Ubiquitin vom E1-Enzym auf und überträgt es auf eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, wodurch es eine zentrale Rolle in der Ubiquitinierungs-Kaskade spielt. Verwandte Referenzen: PMID:16337599, PMID:20061386, PMID:23685073
• In vitro katalysiert UBE2A sowohl 'Lys-11'- als auch 'Lys-48'-verknüpfte Polyubiquitinierung, was auf Vielseitigkeit in der Kettenverknüpfungsspezifität hinweist. Verwandte Referenzen: PMID:20061386
• Zusammen mit der E3-Ligase BRE1 (RNF20/RNF40) monoubiquitiniert UBE2A Histon H2B an Lys-120 (H2BK120ub1), eine epigenetische Markierung, die für die Transkriptionsaktivierung, RNA-Polymerase-II-Elongation, telomerische Stilllegung und als Voraussetzung für H3K4- und H3K79-Methylierung entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:16337599
• UBE2A ist an der Mitophagie beteiligt, indem es als E2-Enzym für die E3-Ligase PRKN fungiert, was auf eine Rolle in der mitochondrialen Qualitätskontrolle hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:23685073
• Im Komplex mit dem E3-Enzym UBR4 ist UBE2A am N-End-Regel-Pfad beteiligt und leitet den Abbau von Proteinen mit spezifischen N-terminalen Resten ein. Verwandte Referenzen: PMID:38182926
• Durch Assoziation mit dem SIFI-Komplex hemmt UBE2A die mitochondriale Stressantwort, was auf eine regulatorische Rolle in der zellulären Proteostase hinweist. Verwandte Referenzen: PMID:38297121
• Subzellulär lokalisiert UBE2A an späten Endosomen und Lysosomen, was mit seinen Funktionen im Proteintransport und -umsatz übereinstimmt.
• UBE2A unterliegt alternativem Spleißen und Phosphorylierung und wird als Chromatinregulator eingestuft, der mit der DNA-Schadensantwort und geistiger Behinderung (MRXSN) in Verbindung steht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das vollständige humane UBE2A-Protein (Reste 1–152), was darauf hindeutet, dass der polyklonale Antikörper mehrere Epitope erkennen und endogenes UBE2A in verschiedenen Spezies, einschließlich der bestätigten Kreuzreaktivitäten mit Human, Maus und Ratte, nachweisen könnte.
• Für Western Blot (WB) sollte das vorhergesagte Molekulargewicht von 17kDa berücksichtigt werden; optimieren Sie die Lysebedingungen und Ladekontrollen, um die Bandspezifität zu validieren, insbesondere angesichts der geringen Proteingröße.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Antigen-Retrieval- und Nachweisbedingungen empirisch bestimmt werden; schließen Sie geeignete Gewebekontrollen und Blockierungsschritte ein, um den Hintergrund zu minimieren.
• Für ELISA kann die polyklonale Natur eine hohe Sensitivität bieten; Titrations- und Schachbrett-Experimente werden empfohlen, um optimale Beschichtungs- und Nachweisparameter zu ermitteln.
• Da UBE2A an mehreren zellulären Prozessen (Ubiquitinierung, Chromatinregulation, Mitophagie) beteiligt ist, kann der Antikörper zur Untersuchung dieser Signalwege verwendet werden, die Ergebnisse sollten jedoch durch geeignete funktionelle Assays oder Knockdown/Überexpressionsexperimente bestätigt werden.

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