Anti-UBA5 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q9GZZ9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: UBA5-Funktion und -Lokalisierung

• UBA5 ist das E1-ähnliche Enzym, das den ersten Schritt der UFM1-Aktivierung im Ufmylierungsweg katalysiert, einem ubiquitinähnlichen Modifikationssystem. Verwandte Referenzen: PMID:15071506, PMID:18442052, PMID:20368332

• Das Enzym aktiviert UFM1 durch Adenylierung seines C-terminalen Glycins mit ATP, gefolgt von der Bildung einer Thioesterbindung zwischen UFM1 und der katalytischen Cysteinin von UBA5, unter Freisetzung von AMP. Verwandte Referenzen: PMID:20368332, PMID:26929408, PMID:27653677

• Die UFM1-Aktivierung erfolgt über einen Trans-Bindungsmechanismus, bei dem UFM1 mit beiden Untereinheiten des UBA5-Homodimers interagiert, was die ATP-Bindung und die Stabilität des Homodimers verbessert. Verwandte Referenzen: PMID:27653677, PMID:29295865

• UBA5 überträgt dann das aktivierte UFM1 auf das E2-ähnliche Enzym UFC1 über einen weiteren Trans-Mechanismus. Verwandte Referenzen: PMID:27653677, PMID:34588452

• Die Ufmylierung, vermittelt durch UBA5, ist an diverse zelluläre Prozesse beteiligt, einschließlich Ribosomen-Recycling, DNA-Schadensantwort, Interferon-Signalisierung und Retikulophagie (ER-Phagie). Verwandte Referenzen: PMID:30412706, PMID:32160526, PMID:35394863

• Die Ufmylierung ist für die erythroide Differenzierung von Megakaryozyten und Erythrozyten unerlässlich.

• UBA5 lokalisiert im Zytoplasma, Kern, Membran des endoplasmatischen Retikulums und Golgi-Apparat.

• Es ist in verschiedenen Geweben weit verbreitet exprimiert und enthält eine Zinkbindedomäne; eine Phosphorylierung wurde identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die volle Länge von menschlichem UBA5 (aa 1–404), sodass der Antikörper sowohl natives als auch denaturiertes Protein erkennen kann. Für Western Blots werden standardmäßige denaturierende und reduzierende Bedingungen empfohlen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Antigen-Retrieval-Methoden je nach Gewebetyp optimiert werden; Positivkontrollgewebe mit bekannter UBA5-Expression (z. B. Leber, Niere) können verwendet werden.
• Die ELISA-Leistung kann je nach Beschichtungsbedingungen variieren; Führen Sie eine Schachbrett-Titration durch, um die optimalen Antikörper- und Antigenkonzentrationen zu ermitteln.
• Aufgrund der hohen Sequenzidentität zwischen menschlichem, murinem und rattigem UBA5 ist eine Kreuzreaktivität zu erwarten, aber bestätigen Sie die Spezifität in Ihrem experimentellen Modell.
• Für quantitative Assays sollten Sie eine Standardkurve mit rekombinantem UBA5-Protein in Betracht ziehen.

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