Polyklonaler Anti-U2AF2/U2AF65-Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA – P26368

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von U2AF2/U2AF65

• U2AF2/U2AF65 ist ein für das prä-mRNA-Spleißen und die 3'-End-Prozessierung essenzieller Spleißfaktor, der durch Bindung an den Polypyrimidintrakt in der Nähe der 3'-Spleißstelle wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:17024186
• Es könnte die Transkription mit dem Spleißen koppeln, indem es den PRP19-Komplex an die C-terminale Domäne der RNA-Polymerase II rekrutiert. Verwandte Referenzen: PMID:21536736
• Das Protein ist im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der mRNA-Prozessierung übereinstimmt.
• U2AF2 reguliert alternative Spleißereignisse, beispielsweise die Induktion des Exon-Einschlusses von kardialem Troponin T (TNNT2) und die Unterdrückung des Spleißens von Exon 10 von MAPT/Tau.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität modulieren können (UniProt-Schlüsselwörter P26368).
• Es wird für den mRNA-Export aus dem Zellkern benötigt, auch bei transkriptähnlichen Molekülen ohne Introns.
• Der UniProt-Eintrag führt zusätzliche Merkmale wie alternatives Spleißen, mit geistiger Behinderung assoziierte Krankheitsvarianten und die Bildung von Isopeptidbindungen auf, was die funktionelle Komplexität hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 192–471 des humanen U2AF2 abdeckt. Diese Region kann wichtige funktionelle Domänen enthalten; prüfen Sie daher die Sequenzabdeckung im Hinblick auf isoformspezifische Anforderungen.
• Beim Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 54 kDa; validieren Sie die Ergebnisse mit geeigneten Positivkontrolllysaten aus humanen oder murinen Zellen bzw. Geweben.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine Kernfärbung zu erwarten; verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um nukleäre Antigene zu erhalten.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) kann die polyklonale Beschaffenheit die Fangeffizienz erhöhen; bestätigen Sie jedoch die Kompatibilität mit nachgelagerten Assays (z. B. Western Blot, Massenspektrometrie).
• Die Eignung für ELISA deutet darauf hin, dass der Antikörper sowohl natives als auch denaturiertes Protein binden kann; optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnungen für quantitative Assays.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus bedeutet, dass der Antikörper in Mausmodellen eingesetzt werden kann; validieren Sie jedoch stets die artspezifische Reaktivität im jeweiligen experimentellen System.

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