Anti-Tyrosin-Hydroxylase Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P07101

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Tyrosin-Hydroxylase (TH)

• Tyrosin-Hydroxylase (TH) katalysiert den geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Katecholamin-Biosynthese: die Umwandlung von L-Tyrosin zu L-Dopa, einem Vorläufer für Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin. Diese Reaktion verwendet Tetrahydrobiopterin und molekularen Sauerstoff; sie kann auch Phenylalanin und Tryptophan mit geringerer Spezifität hydroxylieren. Verwandte Referenzen: PMID:15287903, PMID:1680128, PMID:17391063, PMID:24753243, PMID:34922205, PMID:8528210
• TH gehört zur Familie der biopterin-abhängigen aromatischen Aminosäure-Hydroxylasen und benötigt Eisen als Kofaktor.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen; einige Isoformen besitzen keine katalytische Aktivität.
• Hauptsächlich im Gehirn und in den Nebennieren exprimiert, was ihrer Rolle bei der Neurotransmitter-Synthese entspricht.
• Zur subzellulären Lokalisierung gehören das Zytoplasma (perinukleäre Region), der Zellkern, die Axonendigungen und die synaptischen Vesikel.
• Die Phosphorylierung reguliert die TH-Aktivität; sie wird in Proteomik-Studien als Phosphoprotein identifiziert.
• Krankheitsassoziierte Mutationen im TH sind mit DYT5b-Dystonie, Parkinson-Krankheit und Parkinsonismus verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) kann ein erwarteter Band um 59 kDa nachgewiesen werden; bestätigen Sie dies mit einem positiven Kontrolllysat aus Gehirn- oder Nebennierengewebe. Isoformspezifische Größen können variieren.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist möglicherweise eine Permeabilisierung erforderlich, um auf zytoplasmatische und nukleäre TH-Pools zuzugreifen. Validieren Sie die Färbung in relevanten Zelllinien (z. B. SH-SY5Y Neuroblastom) oder primären Neuronen.
• Da das Immunogen ein synthetisches Peptid ist, kann eine Blockierung mit dem Immunisierungspeptid helfen, die Antikörperspezifität zu bestätigen.
• Optimieren Sie für ELISA die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen empirisch. Der Antikörper erkennt menschliche, murine und rattige TH, was die Entwicklung von assays über Artgrenzen hinweg ermöglicht.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde validiert; dennoch sollten für neue Modellsysteme geeignete Kontrollen eingeschlossen werden.

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